اختبار اليورياز 13 ج: التحضير، والنتائج، والإيجابية، والسلبية

منذ اكتشاف بكتيريا الملوية البوابية المرتبطة بالتهاب المعدة المزمن وقرحة المعدة والاثني عشر، تم تطوير طرق التشخيص، بما في ذلك اختبار اليورياز، الذي يسمح باكتشاف هذه الكائنات الحية الدقيقة في مريض معين، وتأكيد تورطها في تطوير أمراض الجهاز الهضمي ووصف العلاج الفعال.

إنزيم اليورياز كعلامة حيوية لعدوى بكتيريا الملوية البوابية

تحمي بكتيريا الملوية البوابية نفسها من البيئة الحمضية في تجويف المعدة بطريقتين. أولاً، عن طريق إتلاف الغشاء المخاطي بأسواطها، تصل الكائنات الدقيقة إلى طبقاته السفلية، وصولاً إلى الخلايا الظهارية، حيث يكون الرقم الهيدروجيني (pH) أعلى (أي أن الحموضة أقل). ثانياً، تُعادل البكتيريا الحموضة عن طريق تخليق كميات كبيرة من إنزيم اليورياز المعدني عالي الجزيئات النشط تحفيزياً، أو يوريا أميدوهيدرولاز.

إن استخدام اليورياز في تشخيص الجرثومة الملوية البوابية ممكن ليس فقط بسبب النشاط السيتوبلازمي لهذا الإنزيم، بل أيضًا بسبب التفاعل الخارجي مع الخلايا المضيفة.

تحت تأثير إنزيم اليورياز، يتم تحلل اليوريا المعدية إلى نتريد الهيدروجين (الأمونيا) وثاني أكسيد الكربون. يتفاعل هذان المركبان مع حمض الهيدروكلوريك في العصارة المعدية، مما يوفر منطقة حموضة محايدة حول بكتيريا الملوية البوابية، ويدعمان أيضًا عملية أيض الخلايا البكتيرية.

ولهذا السبب فإن اليورياز هو العامل الأكثر أهمية في استعمار الجرثومة الملوية البوابية في الغشاء المخاطي للمعدة البشرية، ويعتبر اكتشاف النشاط التحليلي لليورياز مؤشراً حيوياً على مدى ضراوة هذه البكتيريا، والذي يستخدمه أطباء الجهاز الهضمي - من خلال إجراء اختبار اليورياز - لتشخيص الإصابة بالجرثومة الملوية البوابية، وكذلك لمراقبة نتائج تدمير البكتيريا (القضاء عليها) عن طريق الأدوية.

يشمل تشخيص بكتيريا الملوية البوابية اختباراتٍ باضعة وغير باضعة، وذلك حسب الحاجة إلى فحص المعدة بالمنظار (تنظير المعدة والاثني عشر الليفي). الاختبار الباضع هو اختبار اليورياز السريع أو اختبار اليورياز السريع (RUT-test)، والذي يتطلب أخذ عينات من الأنسجة (خزعة). يُعد اختبار تنفس اليوريا 13C (13C-UBT) أكثر الاختبارات غير الباضعة شيوعًا.

تجدر الإشارة إلى أنه يمكن إجراء تشخيص غير جراحي لبكتيريا الملوية البوابية باستخدام فحص الدم للأجسام المضادة (بدقة 75%، وحساسية 84%)، واختبار الإليزا في البول (بدقة 96% ودقة 79%)، بالإضافة إلى برنامج مشترك لمستضدات البكتيريا. لمزيد من المعلومات - عدوى الملوية البوابية: الأجسام المضادة للملوية البوابية في الدم.

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]، [ 5 ]، [ 6 ]، [ 7 ]

مؤشرات لهذا الإجراء اختبار اليورياز

إن استعمار الغشاء المخاطي للمعدة بواسطة الجرثومة الملوية البوابية ليس مرضًا في حد ذاته، بل هو عامل في زيادة الحمل البكتيري على الجسم، والذي يمكن أن يؤدي في ظل ظروف معينة إلى إثارة تطور عدد من أمراض المعدة والجهاز الهضمي العلوي.

ترتبط مؤشرات تشخيص عدوى الملوية البوابية، وخاصةً اختبار اليورياز، بالتهاب المعدة مع زيادة الحموضة، والتهاب المعدة الغاري والضموري، والتهاب الاثني عشر، وقرحة المعدة والاثني عشر، وسرطان الغدد الليمفاوية المعوية MALT. بعد استئصال سرطان المعدة في مراحله المبكرة بالمنظار، يمكن إجراء فحص نسيجي بالتزامن مع اختبار اليورياز السريع (FGDS) مع اختبار اليورياز.

قد يصف أطباء الجهاز الهضمي اختبار اليورياز إذا اشتكى المرضى من الشعور بالثقل وعدم الراحة في منطقة فوق المعدة، وحرقة المعدة المتكررة بعد تناول الطعام، والتجشؤ الحامض أو الفاسد، والمرارة في الفم، والغثيان، واضطرابات الأمعاء، والألم المؤلم أو المتشنج في المعدة.

[ 8 ]، [ 9 ]

تجهيز

يتضمن التحضير لاختبار اليوريا 13C في التنفس إيقاف المريض عن تناول المضادات الحيوية قبل أربعة أسابيع من الاختبار، ومضادات الالتهاب غير الستيرويدية، ومثبطات مضخة البروتون (التي تُقلل حموضة المعدة)، ومضادات الحموضة أو المواد الماصة المستخدمة لعلاج حرقة المعدة - قبل أسبوعين على الأقل. يجب التوقف عن تناول أي أدوية قبل خمسة إلى ستة أيام، وعن تناول الكحول والتدخين قبل ثلاثة أيام من الاختبار.

كما ينصح بتجنب تناول البقوليات لمدة أسبوع تقريباً قبل إجراء الاختبار، حيث تحتوي الفاصوليا والبازلاء والعدس وفول الصويا والفاصوليا على اليورياز (الذي يحمي النباتات من الأمراض والآفات الحشرية).

في الليلة السابقة للاختبار، يُمنع تناول عشاء دسم متأخر؛ في يوم الاختبار، يجب عليك القيام بنظافة الفم بشكل طبيعي، وقبل ساعة ونصف من الاختبار، يجب عليك عدم شرب أي شيء أو استخدام العلكة.

[ 10 ]، [ 11 ]، [ 12 ]، [ 13 ]، [ 14 ]

تقنية اختبار اليورياز

تقنية التنفيذ:

• أولاً، يتم أخذ عينة تنفس أساسية - يتم الزفير في حاوية بلاستيكية ناعمة (ومغلقة بإحكام)؛
• يؤخذ السائل المضاف إليه اليوريا 13C عن طريق الفم؛
• بعد مرور 25-30 دقيقة، يتم أخذ عينة ثانية من الهواء الزفير إلى وعاء آخر.

تُحلل العينات المُحصّلة بهذه الطريقة على مطياف الكتلة، مع فصل النظائر في عينة ثانية وتحديد تركيزها. يُعبّر عن الفرق بين قيم العينة الثانية والأولى بدلتا (δ) مقارنةً بالمستوى الأساسي. تتراوح القيم الطبيعية، أي القيم السالبة للذرة المُوسومة 13C، لدى المرضى غير المصابين بالعدوى بين 0.15% و0.46%، بينما تتراوح القيم الموجبة في وجود العدوى بين 1.2% و9.5%، مع معدل تحلل اليوريا الذي يزيد عن 12-14 ميكروغرام/دقيقة.

وبعبارة بسيطة: يشير اكتشاف ثاني أكسيد الكربون المسمى بالكربون 13 في الهواء الزفير إلى أن اليوريا تم تحللها بواسطة إنزيم اليورياز H. pylori، وهو ما يؤكد في الواقع حقيقة وجودها في المعدة.

اختبار التنفس لبكتيريا الملوية البوابية

اختبار 13C-UBT أو اختبار تنفس اليوريا 13C لـ Helicobacter pylori هو أحد أهم الطرق غير الجراحية للكشف عن هذه العدوى: مع حساسية 100٪ وخصوصية 98٪، فإن خطر النتائج الإيجابية الكاذبة والسلبية الكاذبة مقارنة باختبار علم الأنسجة واختبار الأجسام المضادة في الدم أقل بنسبة 2.3٪.

يعتمد التحليل على التحلل المائي لليوريا السائلة التي يتم تناولها عن طريق الفم والمُسماة بذرة الكربون (نظير غير مشع مستقر) 13C (50-75 ملغ من اليوريا 13C المخففة في 100 مل من السائل) بواسطة يورياز هيليكوباكتر بيلوري.

تخضع اليوريا المُعَلَّمة بمؤشر نظيري للتحلل المائي في المعدة، مُطلقةً ذرات الأمونيا وثاني أكسيد الكربون المُعَلَّمة، والتي تنتشر في الدم وتُطرَد من الرئتين أثناء التنفس. يُسجَّل ثاني أكسيد الكربون المُعَلَّم بواسطة جهاز تحليلي - مطياف الكتلة، الذي يعتمد على التحليل الطيفي الانتقائي للنظائر غير المُشتَّت، أو مُحلِّل مطياف الأشعة تحت الحمراء.

اختبار اليورياز السريع

يُجرى اختبار اليورياز السريع (RUT) أثناء الفحص التنظيري للمعدة والاثني عشر باستخدام مناظير ليفية حديثة، مع أخذ عينات خزعة في نفس الوقت. يُفترض أن تُؤخذ المادة الحيوية من الجزء الغاري للمعدة. لذا، يُعدّ تنظير المعدة والاثني عشر الليفي (FGDS) مع اختبار اليورياز طريقة تشخيصية باضعة.

يتم غمر الخزعة التي تم الحصول عليها بالكامل في وسط موحد مُجهز يحتوي على هلام أجار، ويوريا، ومؤشر حمضي قاعدي فينول سلفوفثالين، وعامل مضاد للبكتيريا (يُضاف لمنع نمو الكائنات الحية الدقيقة الملوثة والنتائج الإيجابية الكاذبة).

إذا وُجدت بكتيريا الملوية البوابية في عينة أنسجة المعدة، فإن إنزيم اليورياز الذي تُنتجه سيُحلل اليوريا ويرفع درجة الحموضة، وهو ما يتضح جليًا عند تغير لون المؤشر من الأصفر إلى البرتقالي (عند درجة حموضة 6.8) والأرجواني (عند درجة حموضة > 8). يتغير لون 75% من الاختبارات الإيجابية خلال 120-180 دقيقة، وكلما زادت سرعة تغير لون المؤشر، زاد عدد البكتيريا. أما الاختبارات التي تظهر سلبية، فيُحتفظ بها لمدة 24 ساعة.

نتيجة إيجابية لاختبار اليورياز السريع، ماذا يعني ذلك؟ تعني نتيجة اختبار RUT الإيجابية - حيث يتحول المؤشر إلى اللون الأحمر - أن عينة الخزعة الموضوعة في وسط الأجار تحتوي على 105 بكتيريا ملوية البواب على الأقل، مع أن تركيزها يكون أعلى عادةً.

تتراوح حساسية التعديلات المختلفة للاختبار في نطاق 90-98%، والخصوصية - 97-99%.

كما أشار أطباء الجهاز الهضمي، إذا أشارت نتيجة فحص المريض إلى نتيجة إيجابية حادة في اختبار اليورياز (ثلاثة تقاطعات)، فهذا يعني أن الرقم الهيدروجيني (pH) > 8، وأن لون المؤشر تغير في أقل من 60 دقيقة من لحظة غمر الخزعة، مما يدل على وجود عدد كبير من الملوية البوابية وارتفاع مستوى التعبير عن اليورياز. يمكن إحصاء العدد التقريبي للبكتيريا أثناء الفحص النسيجي للخزعة تحت المجهر، وإذا تجاوز العدد 40-50 في المنطقة المُصوَّرة، يُعتبر مستوى العدوى مرتفعًا.

نادرًا ما يعطي اختبار تنفس اليوريا 13C نتائج إيجابية خاطئة، وفي المرضى الذين يُشتبه في إصابتهم بقرحة المعدة أو الاثني عشر، يتم اعتبار اختبار إيجابي واحد لتأكيد التشخيص، في حين يجب تأكيد النتيجة السلبية عن طريق تصوير المعدة والأمعاء الغليظة باختبار اليوريا.