الفحص المجهري للقرنية متحد البؤر مدى الحياة

يعد الفحص المجهري البؤري للقرنية أحد طرق البحث الحديثة، حيث يسمح بمراقبة القرنية داخل الجسم الحي مع تصور الأنسجة على المستوى الخلوي والبنيوي الدقيق.

تسمح هذه الطريقة، بفضل التصميم الأصلي للمجهر وقدرته العالية على التحليل، بتصور أنسجة القرنية الحية ، وقياس سمك كل طبقة من طبقاتها، وتقييم درجة الاضطرابات المورفولوجية.

غرض المجهر البؤري للقرنية

لتحديد التغيرات المورفولوجية للقرنية التي تحدث في مختلف الأمراض الالتهابية والضمورية ، وكذلك نتيجة للتدخلات الجراحية والتعرض للCL.

تعتبر بيانات الفحص المورفولوجي ضرورية لتقييم شدة العملية المرضية وفعالية العلاج وتحديد تكتيكات إدارة المريض.

مؤشرات لهذا الإجراء

• أمراض التهابية في القرنية ( التهاب القرنية ).
• أمراض ضمور القرنية ( القرنية المخروطية ، ضمور فوكس ، الخ).
• متلازمة جفاف العين.
• الحالات بعد التدخلات الجراحية على القرنية ( زراعة القرنية النافذة ، جراحات تصحيح الانكسار القرني).
• الحالات المرتبطة بارتداء العدسات اللاصقة.

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]

تجهيز

يمكن إجراء هذا الفحص دون استخدام التخدير. تُوضع قطرة من سائل الغمر على العدسة الشيئية للمجهر البؤري. هذا يمنع التلامس المباشر للعدسة مع القرنية، ويقلل من خطر تلف الظهارة.

[ 5 ]، [ 6 ]، [ 7 ]، [ 8 ]، [ 9 ]

تقنية الفحص المجهري متحد البؤر للقرنية

تُجرى الدراسة باستخدام مجهر كونفوسكان 4 (نايدر) متحد البؤر بتكبير 500 مرة. يتيح هذا الجهاز فحص القرنية بكامل سمكها.

تبلغ مساحة المنطقة المفحوصة 440×330 ميكرومتر، وسمك طبقة المسح 5 ميكرومتر. تُوضع العدسة مع قطرة من الجل على القرنية حتى تلامسها، وتُركّب بحيث يكون سمك طبقة السائل الغاطس 2 مم. يسمح تصميم الجهاز بفحص القرنية في المنطقة المركزية والمناطق المحيطة بها.

موانع لهذا الإجراء

موانع الاستعمال النسبية هي تهيج العين الشديد بسبب عملية التهابية حادة.

[ 10 ]، [ 11 ]

الأداء الطبيعي

صورة مورفولوجية طبيعية للقرنية

تتكون الظهارة الأمامية من 5-6 طبقات من الخلايا. يبلغ متوسط سمك الظهارة بأكملها حوالي 50 ميكرومترًا. ووفقًا للبنية المورفولوجية، تُميز الطبقات التالية (من الداخل إلى الخارج): الخلايا القاعدية، والخلايا المخروطية، والخلايا السطحية.

• الطبقة الداخلية (القاعدية) تتكون من خلايا أسطوانية صغيرة كثيفة بدون نواة مرئية. حدود الخلايا القاعدية واضحة وساطعة.
• تتكون الطبقة الوسطى من طبقتين أو ثلاث طبقات من الخلايا الشوكية (المجنحة) ذات انثناءات عميقة تندمج فيها نتوءات الخلايا المجاورة. مجهريًا، تكون حدود الخلايا واضحة تمامًا، وقد تكون النوى غير محددة أو غير واضحة.
• تتكون الطبقة السطحية من الظهارة من طبقة أو طبقتين من الخلايا متعددة الأضلاع ذات حدود واضحة وكثافة متجانسة. عادةً ما تكون النوى أكثر سطوعًا من السيتوبلازم، حيث يمكن أيضًا تمييز حلقة داكنة حول النواة.

من بين خلايا الطبقة السطحية، تتميز الخلايا الداكنة والفاتحة. تشير زيادة انعكاسية الخلايا الظهارية إلى انخفاض معدل أيضها وبدء تقشرها.

غشاء بومان هو بنية شفافة لا تعكس الضوء، لذلك من المستحيل عادة تصوره باستخدام المجهر البؤري.

تقع الضفيرة العصبية تحت القاعدية تحت غشاء بومان. عادةً، تظهر الألياف العصبية كخطوط لامعة متوازية على خلفية داكنة، متلامسة. قد تكون الانعكاسية (الانعكاسية) غير متساوية على طول الألياف.

تشغل سدى القرنية ما بين 80% و90% من سمك القرنية، وتتكون من مكونات خلوية وخارج خلوية. الخلايا الكيراتينية هي المكونات الخلوية الرئيسية للسد، وتمثل حوالي 5% من حجم القرنية.

تتضمن الصورة المجهرية النموذجية للستروما عدة أجسام بيضاوية لامعة غير منتظمة الشكل (نوى الخلايا الكيراتينية) تقع في سمك مصفوفة شفافة رمادية داكنة أو سوداء. عادةً، يستحيل تصوير البنى خارج الخلية بسبب شفافيتها. يمكن تقسيم الستروما إلى طبقات فرعية: أمامية (تقع مباشرة تحت غشاء بومان وتمثل 10% من سمكها)، وأمامية متوسطة، ووسطى، وخلفية.

متوسط كثافة الخلايا الكيراتوسايت أعلى في السدى الأمامي، ويتناقص تدريجيًا نحو الطبقات الخلفية. كثافة الخلايا الكيراتوسايت الأمامية أعلى بمرتين تقريبًا من كثافة الخلايا الكيراتوسايت الخلفية (إذا كانت كثافة الخلايا الكيراتوسايت الأمامية 100%، فإن كثافة الخلايا الكيراتوسايت الخلفية ستكون حوالي 53.7%). في السدى الأمامي، تكون نوى الخلايا الكيراتوسايت مستديرة الشكل، بينما تكون بيضاوية وأكثر استطالة في السدى الخلفي.

قد يختلف سطوع نوى الخلايا الكيراتينية. ويعتمد اختلاف قدرتها على عكس الضوء على حالتها الأيضية. تُعتبر الخلايا الأكثر سطوعًا خلايا كيراتينية نشطة (خلايا "إجهاد")، ويهدف نشاطها إلى الحفاظ على التوازن الداخلي للقرنية. توجد خلايا نشطة مفردة في المجال الطبيعي والمجال البصري.

تظهر الألياف العصبية في سدى القرنية الأمامي على شكل أشرطة متجانسة زاهية، وغالبًا ما تشكل تشعبات.

غشاء ديسيميه شفاف عادة ولا يمكن رؤيته بالمجهر البؤري.

الطبقة الظهارية الخلفية هي طبقة أحادية من الخلايا المسطحة السداسية أو المتعددة الأضلاع ذات سطح فاتح موحد على خلفية من الحدود بين الخلايا الداكنة الواضحة.

يتمتع الجهاز بالقدرة على حساب كثافة الخلايا ومساحتها ومعامل التباين يدويًا أو تلقائيًا.

التغيرات المرضية في بنية القرنية

يتميز مرض القرنية المخروطية بتغيرات كبيرة في الظهارة الأمامية والنسيج الظهاري للقرنية.

[ 12 ]، [ 13 ]، [ 14 ]، [ 15 ]، [ 16 ]، [ 17 ]، [ 18 ]، [ 19 ]، [ 20 ]