القيود والأخطار ومضاعفات زرع الخلايا

ويستند الطب التجديدي البلاستيك على تحقيق في الخلايا الجذعية الجنينية والسلف المحفزة العيادة وخصائص toti-، مما يسمح في المختبر والمجراة لإنشاء خطوط الخلايا المحددة سلفا إعادة إسكانها الأنسجة والأعضاء من المريض البشرية التالفة.

لم يعد الشك في إمكانية استخدام الخلايا الجذعية للجنين والخلايا الجذعية للنسيج النهائي (ما يسمى بالخلايا الجذعية البالغة) للإنسان لأغراض علاجية. ومع ذلك ، يوصي الخبراء في الأكاديميات الوطنية والهيئات الطبية في الولايات المتحدة الأمريكية (US) بدراسة خصائص الخلايا الجذعية في التجارب بمزيد من التفصيل. على النماذج البيولوجية الكافية وتقييم موضوعي لجميع عواقب الزرع ، وعندها فقط استخدام الخلايا الجذعية في العيادة.

ثبت أن الخلايا الجذعية هي جزء من المشتقات النسيجية للنشرات الجنينية الثلاث. وتوجد الخلايا الجذعية في شبكية العين والقرنية والجلد والبشرة، ونخاع العظام والدم المحيطي، في الأوعية، لب السن، والكلى، وظهارة من الجهاز الهضمي والبنكرياس والكبد. مع مساعدة من الأساليب الحديثة ثبت أن الخلايا الجذعية العصبية يتم تحديد موقعها في الدماغ الكبار والحبل الشوكي. جذبت هذه البيانات المثيرة اهتمامًا خاصًّا من العلماء ووسائل الإعلام ، حيث كانت الخلايا العصبية في الدماغ بمثابة مثال كلاسيكي على مجموعة الخلايا الساكنة التي لا تتعافى. كلتا الفترتين المبكرة والمتأخرة من ontogenesis نظرا لالخلايا الجذعية العصبية في الدماغ ولدت الخلايا العصبية، الخلايا النجمية الإنسان والحيوان و oligodendrocytes (خلايا الجذعية: التقدم العلمي واتجاهات البحوث في المستقبل نات انست، الصحة USA ..).

ومع ذلك ، في ظل ظروف طبيعية ، لا تظهر اللدونة من الخلايا الجذعية من الأنسجة نهائي. ولتحقيق القدرة البلاستيكية للخلايا الجذعية للأنسجة المحددة ، يجب عزلها ثم زرعها في وسائل الإعلام باستخدام السيتوكينات (LIF ، EGF ، FGF). علاوة على ذلك ، نجحت مشتقات الخلايا الجذعية في البقاء فقط عندما يتم زرعها في جسم حيوان ذي جهاز مناعة منخفض (γ- إشعاع ، تخرل للخلايا ، بوسولفان ، إلخ). حتى الآن ، لم يكن هناك أي دليل مقنع على مرونة الخلايا الجذعية في الحيوانات التي لم يتم تعريضها للإشعاع أو تعرضت بشكل آخر لكبت المناعة العميقة.

في مثل هذه الظروف، تتجلى بغتش قوة خطرة في المقام الأول في مجال زرع خارج الرحم لها - حقن تحت الجلد ESK الفئران العوز المناعي في موقع الحقن سرطانة مسخية تشكيلها. وعلاوة على ذلك، خلال تردد التطور الجنيني البشري من شذوذ الكروموسومات مما كان عليه في مرحلة التطور الجنيني في الحيوانات. في مرحلة الكيسة الأريمية وتتكون٪ فقط 20-25 من أجنة بشرية من الخلايا مع النمط النووي العادي، والغالبية العظمى من الأجنة البشرية في مراحلها المبكرة التي تم الحصول عليها بعد الإخصاب في المختبر، الكروموسومات الاصباغ الكشف عن الانحرافات العددية والهيكلية الفوضى ومتكررة جدا.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

تأثير مفيد للخلايا الجذعية

تؤكد النتائج الأولية للتجارب السريرية التأثير النافع للخلايا الجذعية على المريض ، لكن حتى الآن لا توجد معلومات حول النتائج طويلة المدى لزراعة الخلايا. في الأدب، ويهيمن عليها في البداية بسبب تقارير عن النتائج الإيجابية لزرع نخاع شظايا من الأجنة في مرض الشلل الرعاش، ولكن بعد ذلك بدأت تظهر البيانات إنكار الآثار العلاجية الفعالة من الأنسجة العصبية الجنينية أو الجنين زرعها في أدمغة المرضى.

في منتصف القرن العشرين تم اكتشاف استعادة الدم لأول مرة في الحيوانات المعرضة للإشعاع قاتل بعد نقل الوريد من خلايا نخاع العظم، وفي عام 1969 الباحث الأمريكي توماس D. أداء أول عملية زرع نخاع العظم الرجل. نقص في المعرفة حول آليات المناعة التعارض نخاع العظم المانحة والمتلقية في حين ارتفاع معدل الوفيات الناجمة بسبب الكسب غير المشروع neprizhivleniya المتكرر ورد فعل التنمية "الكسب غير المشروع مقابل المضيف". اكتشاف معقد التوافق النسيجي الكبير، الذي يتكون من مستضد الكريات البيض البشرية (HBA)، وتحسين أساليب الكتابة من الممكن تحقيق زيادة كبيرة في معدل البقاء على قيد الحياة بعد زرع نخاع العظام، مما أدى إلى نطاق واسع هذه الطريقة من العلاج في الأورام وأمراض الدم. بعد عقد من الزمان ، تم إجراء أول عملية زرع للخلايا الجذعية المكونة للدم (HSC) تم الحصول عليها من الدم المحيطي بمساعدة اللوكيميا. في عام 1988 في فرنسا لعلاج الطفل المصاب بفقر الدم فانكوني كمصدر للHSCs كان يستخدم لأول مرة دم الحبل السري، ونهاية عام 2000 في الصحف بدأت تظهر حول قدرة HSCs على التمايز إلى خلايا أنواع الأنسجة المختلفة التي يحتمل أن يوسع نطاق تطبيقها السريري. ومع ذلك ، اتضح أن المواد المستخدمة في الزرع ، جنبا إلى جنب مع GSK ، تحتوي على كمية كبيرة من الخلايا غير المكونة للدم ، والتي تتنوع في الطبيعة والخصائص. فيما يتعلق بهذا ، يجري تطوير طرق لتنقية الكسب غير المشروع ومعايير لتقييم نقاوتها الخلوية. على وجه الخصوص ، يتم استخدام immunosection إيجابي من الخلايا CD34 + ، مما يجعل من الممكن عزل HSC بمساعدة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة.

[8], [9], [10], [11], [12]

مضاعفات العلاج بالخلايا الجذعية

غالباً ما تكون مضاعفات زراعة نخاع العظم الدموية ، وترتبط مع فترة طويلة من قلة الكريات الشاملة علاجي المنشأ. العدوى الأكثر شيوعا هي فقر الدم وفقر الدم والنزيف. وفي هذا الصدد من المهم جدا كيفية العثور على أخذ العينات المثلى الوضع ومعالجة وتخزين نخاع العظام للمحافظة على الحد الأقصى من الخلايا الجذعية التي توفر انتعاش سريع ومستقر من الدم. في وصف الكسب غير المشروع المتخذة لتقييم المعلمات التالية هي عليه الآن: عدد حيدات النوى و / أو خلايا الأنوية، والخلايا مستعمرة تشكيل وحدات المحتوى SB34 إيجابية. لسوء الحظ ، فإن هذه المؤشرات تقدم فقط تقديرا غير مباشر للقدرة الحقيقية للدم لخلايا زرع الخلايا الجذعية. لهذا اليوم ، هناك معايير دقيقة تماما لتحديد مدى كفاية عملية الزرع من أجل انتعاش تكون الدم على المدى الطويل في المرضى حتى في زرع نخاع العظم ذاتي. إن وضع معايير مشتركة أمر صعب للغاية بسبب عدم وجود معايير معالجة صارمة والحفظ بالتبريد واختبار الكسب غير المشروع. بالإضافة إلى ذلك ، فمن الضروري أن تأخذ في الاعتبار مجموعة متنوعة من العوامل التي تؤثر على معايير الانتعاش ناجحة من تكون الدم في كل مريض معين. في ذاتي زرع نخاع العظام أهم هذه هي عدد من الأنظمة السابقة، وخاصة نظام تكييف، مدة المرض، والتي يتم إنتاجها في نخاع العظم مخطط جمع مستعمرة تطبيق تحفيز العوامل في الفترة posttransplant. بالإضافة إلى ذلك ، لا ينبغي أن ننسى أن العلاج الكيميائي الذي سبقه تطعيم الجنين يمكن أن يكون له تأثير سلبي على الخلايا الجذعية لنخاع العظم.

حدوث مضاعفات سامة شديدة يزيد بشكل كبير مع زرع نخاع العظم خيفي. في هذا الصدد ، فإن البيانات الإحصائية حول زرع نخاع العظم خيفي في الثلاسيميا هي ذات أهمية. في تقارير المجموعة الأوروبية لزراعة نخاع العظام ، تم تسجيل حوالي 800 عملية زرع نخاع عظمي في مرضى الثلاسيميا الكبيرة. زرع خيفي في الثلاسيميا في معظم الحالات يقوم من الأشقاء HLA متطابقة، الذي يرتبط مع مضاعفات خطيرة وارتفاع معدل الوفيات في زرع الخلايا الجذعية المواد المتعلقة متوافقة جزئيا أو الجهات المانحة لا علاقة مطابقة. لتقليل خطر المضاعفات المعدية المميتة ، يتم وضع المرضى في صناديق معقمة معزولة مع تدفق الهواء الصفحي ، وتلقي نظام غذائي منخفض أو بكتيريا. لإزالة التلوث البكتيري من الأمعاء في نظام التشغيل العكسي يصف أشكالا غير استغناء من المضادات الحيوية والأدوية المضادة للفطريات. من أجل منع أمفوتيريسين الوريد B. منع الالتهابات الجهازية أميكاسين والسيفنازيديم الثابتة، التي تسمي اليوم قبل الزرع، مع استمرار العلاج لتصريف المرضى. يتم تعريض جميع مستحضرات الدم قبل التعرض للإشعاع بجرعة قدرها 30 Gy. التغذية الوريدية أثناء الزرع هي شرط أساسي وتبدأ على الفور من خلال الحد من تناول الطعام بشكل طبيعي.

ويرتبط عدد من المضاعفات مع سمية عالية من الأدوية المثبطة للمناعة ، والتي غالبا ما تسبب الغثيان والقيء والتهاب الغشاء المخاطي وتلف الكلى والالتهاب الرئوي الخلالي. واحدة من المضاعفات الأكثر خطورة من العلاج الكيميائي هو مرض انسداد الكبد من الكبد ، مما يؤدي إلى الموت في فترة ما بعد الزرع في وقت مبكر. ومن بين عوامل الخطر للتخثر وريدي لنظام بوابة الكبد وتجدر الإشارة إلى سن المريض، وجود التهاب الكبد وتليف الكبد، وعقد العلاج مناعة بعد زرع نخاع العظام. مرض انسداد فينيو خطير بشكل خاص في الثلاسيميا ، الذي يصاحبه هيموسيديريزيد في الكبد والتهاب الكبد والتليف - سواتل متكررة من العلاج نقل الدم. الخثار الوريدي للنظام بوابة الكبد يتطور في غضون 1-2 أسابيع بعد زرع ويتميز الزيادة السريعة في البيليروبين في الدم والترانساميناسات، تضخم الكبد التدريجي، استسقاء، التهاب الدماغ، والألم في الجزء العلوي من البطن. تشريحيا مادة التشريح محددة في تلف البطانية، ونزيف تحت البطانة، والآفات tsentrolobulyarnyh خلايا الكبد، الجلطات انسداد الأوردة الكبدية والوريد المركزي. في المرضى الذين يعانون من الثلاسيميا ، تم وصف حالات السكتة القاتلة القاتلة المرتبطة بالآثار السامة للتخثر.

في التحضير للزرع ، سيكلوفوسفاميد و بوسولفان غالبا ما تسبب التهاب المثانة السمية النزفية مع التغيرات المرضية في الخلايا الظهارية. غالبًا ما يكون استخدام السيكلوسبورين A في زراعة النخاع العظمي مصحوبًا بتأثيرات كونية وعصبية ، ومتلازمة فرط ضغط الدم ، واحتباس السوائل في الجسم ، و cytolysis من خلايا الكبد. وغالبا ما لوحظ انتهاك في ممارسة الجنس والانجاب في النساء. في الأطفال الصغار بعد زراعة البلوغ النامية عادة لا يعاني ، ولكن عند الأطفال الأكبر سنا يمكن أن يكون مرض تطور المجال التناسلي خطير جدا - يصل إلى العقم. تشمل المضاعفات المرتبطة مباشرة بعملية الزرع نفسها رفض خلايا نخاع العظم الخيفي ، وعدم التوافق في نظام ABO ، والأشكال الحادة والمزمنة من تفاعل "التطعيم ضد المضيف".

في جسم المريض بعد عملية الزرع-ABO يتعارض نخاع العظام نوع راصة ذاتية "المضيف ضد ABO المانحة" المنتجة داخل 330-605 يوما بعد الزرع، والتي يمكن أن تؤدي إلى انحلال الدم لفترات طويلة وزيادة حادة في الحاجة إلى نقل الدم. يتم منع المضاعفات وقال عن طريق نقل الدم من مجموعة كريات الدم الحمراء فقط 0. بعد زرع في عدد من المرضى العدلات المناعة الذاتية، قلة الصفيحات، قلة الكريات الشاملة، أو لتصحيح والتي يجب أن يتم استئصال الطحال.

في 35-40٪ من المستفيدين من رد فعل حاد "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" يتطور خلال 100 يوم بعد زرع خيفي-الهيموجلوبين مطابقة نخاع العظام. درجة آفات الجلد والكبد والأمعاء تختلف من الطفح الجلدي، فرط بيليروبين الدم والإسهال وخفيفة إلى التقشر الجلد، وانسداد معوي، وفشل الكبد الحاد. المرضى الذين يعانون من مرض الثلاسيميا تردد الحاد رد فعل "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" I مدى بعد زرع النخاع العظمي هو 75٪ والثاني وأعلى حد - 11-53٪. رد فعل المزمن "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" بأنه متلازمة أعضاء متعددة النظامية عادة ما يتطور داخل 100-500 يوما بعد زرع نخاع العظم خيفي في 30-50٪ من المرضى. يتأثر الجلد والفم والكبد والعينين والمريء والجهاز التنفسي العلوي. تميز شكل محدود المزمن رد فعل "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" عندما يكون الجلد المصاب و / أو الكبد، وعلى نطاق واسع، والآفات الجلدية المعمم عندما يقترن التهاب الكبد المزمن العدواني، وأمراض العين والغدد اللعابية أو أي جهاز آخر. غالبًا ما يكون سبب الوفاة هو المضاعفات المعدية الناتجة عن نقص المناعة الوخيم. في شكل خفيف مزمن التلاسيمية من "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" رد فعل وجد في 12٪، متوسطة - 3٪ وشديد - أن يكون 0.9٪ من المستفيدين من HLA-متوافق نخاع العظام الصنعية. هناك اختلاط خطير في زرع نخاع العظم هو رفض الزرع ، والذي يتطور بعد 50-130 يوما من العملية. يعتمد تردد الرفض على وضع التكييف. على وجه الخصوص، المرضى الذين يعانون من مرض الثلاسيميا معاملة أثناء إعداد الميثوتريكسيت وحده، لوحظ رفض الكسب غير المشروع نخاع العظام في 26٪ من الحالات، مزيج من الميثوتريكسيت مع السيكلوسبورين A - 9٪، وعند تعيين فقط السيكلوسبورين A - 8٪ من الحالات (Haziyev الخ . ، 1995).

المضاعفات المعدية بعد زرع نخاع العظام التي تسببها الفيروسات والبكتيريا والفطريات. يتم توصيل تنميتها مع العدلات العميقة التي يسببها خلال تكييف العلاج الكيميائي، التخلاء هزيمة الحواجز المخاطية ورد فعل "الكسب غير المشروع مقابل المضيف". اعتمادا على الوقت من التنمية، هناك ثلاث مراحل العدوى. في المرحلة الأولى (النامية في الشهر الأول بعد زرع) يهيمن عليها الأضرار التي لحقت حاجز الغشاء المخاطي والعدلات، وغالبا ما يرافقه العدوى الفيروسية (الهربس، وفيروس ابشتاين بار، الفيروس المضخم للخلايا، الحماق النطاقي)، فضلا عن الالتهابات التي تسببها grampolozhi - البكتيريا التهابات وسالبة الجرام، المبيضات الفطريات ، الرشاشيات. في أوائل فترة ما بعد الزرع (بعد أشهر الثانية والثالثة زرع) هو عدوى الفيروس المضخم للخلايا أشد، الذي غالبا ما يؤدي إلى وفاة المرضى في المرحلة الثانية من العدوى. الثلاسيميا عدوى الفيروس المضخم للخلايا بعد زرع نخاع العظام يحدث في 1،7-4،4٪ من المتلقين. لوحظ المرحلة الثالثة في الفترة المتأخرة بعد زرع (بعد ثلاثة أشهر من العملية)، ويتميز نقص المناعة المشترك الشديد. تم العثور على هذه الفترة عادة الالتهابات التي تسببها الحماق النطاقي، العقدية، التهاب كاريني، النيسرية السحائية، المستدمية النزلية، والفيروسات كبدي التوجه. ويرتبط معدل وفيات مرضى الثلاسيميا في المرضى بعد زرع نخاع العظام مع الإنتان الجرثومي والفطري، فراغي مجهول السبب والالتهاب الرئوي الفيروس المضخم للخلايا، متلازمة الضائقة التنفسية الحادة، وفشل القلب الحاد، دكاك القلب، ونزيف فى المخ، وأمراض الكبد وvenookklyuzionnoy الحاد رد فعل "الكسب غير المشروع مقابل المضيف".

في الوقت الحاضر ، تم إحراز تقدم معين في تطوير طرق لعزل نخاع العظم من مجموعة نقية من الخلايا المكونة للدم. تم تحسين تقنية الحصول على دماء الجنين من الحبل السري وطورت طرق لعزل الخلايا المكونة للدم من دم الحبل السري. في الصحافة العلمية هناك تقارير تفيد أنه عندما يتم استزراعها في وسائل الإعلام باستخدام السيتوكينات ، فإن الخلايا الجذعية المكونة للدم قادرة على التكاثر. عند استخدام المفاعلات الحيوية المصممة خصيصا لتوسيع HSC ، يتم زيادة الكتلة الحيوية لخلايا المكونة للدم الجذعية المعزولة من نخاع العظم أو الدم المحيطي أو الحبل السري بشكل ملحوظ. إمكانية التوسع HSC هو خطوة مهمة في التطوير السريري لزرع الخلايا.

ومع ذلك ، قبل استنساخ HSC في المختبر ، فمن الضروري لعزل مجموعة متجانسة من الخلايا الجذعية المكونة للدم. ويتحقق ذلك عادة ما تستخدم علامات، والسماح للاحتفال بشكل انتقائي HSC الاجسام المضادة ترتبط تساهميا لتسمية المغناطيسية أو الفلورسنت، وحدد لهم فارز خلية مناسبة. في الوقت نفسه ، لم يتم حل مشكلة الخصائص المظهرية للخلايا الجذعية المكونة للدم في النهاية. A. بترينكو.، V. Hryschenko (2003) كمرشحين لGSK معاملة الخلايا، والتي تكون موجودة على سطح CD34، AC133 ومولدات المضادات Thyl ولا CD38، HLA-DR وغيرها من علامات التمايز (الخلايا التي تحتوي على CD34 النمط الظاهري + Liir). بواسطة علامات التمايز الخطية (النسب، لين) تشمل glycophorin A (GPA)، CD3، CD4، CD8، CD10، CD14، CD16، CD19، CD20 (مونش، 2001). تعتبر واعدة لزرع الخلايا مع النمط الظاهري CD34 + CD45RalüW CD71low، فضلا عن CD34 + Thyl + CD38low / ج طقم / منخفضة.

مشكلة عدد من HSCs كافية لزراعة فعالة لا يزال يمثل مشكلة. في الوقت الحالي ، يكون مصدر الخلايا المكونة للدم الجذعية عبارة عن نخاع العظم ودم طرفي ودم الحبل السري وكذلك الكبد الجنيني. يتم تحقيق توسيع الخلايا المكونة للدم من خلال زرعها في وجود الخلايا الباطنة وعوامل النمو المكونة للدم. في بروتوكولات مختلفة ، يتم استخدام الميلوبروتينات ، SCF ، erythropoietin ، عوامل نمو تشبه الانسولين ، الستيرويدات القشرية والإستروجين للحث على انتشار HSC. عندما يتم استخدام مجموعات من السيتوكينات في المختبر ، يمكن تحقيق زيادة كبيرة في تجمع HSC مع ذروة إطلاقها في نهاية الأسبوع الثاني من الزراعة.

تقليديا ، يتم استخدام الدم الحبل السري HSC بشكل رئيسي في hemoblastoses. ومع ذلك ، فإن الحد الأدنى لجرعة الخلايا المكونة للدم اللازمة لنجاح زرع خلايا دم الحبل السري هو 3.7 × 10 ⁷ خلية أنوية لكل 1 كجم من وزن الجسم للمتلقي. استخدام كمية أصغر من HSC يزيد بشكل كبير من خطر فشل الكسب غير المشروع وانتكاس المرض. لذلك ، يتم استخدام زرع الخلايا المكونة للدم من دم الحبل السري بشكل رئيسي في علاج داء hemoblastosis في الأطفال.

للأسف، لا يوجد حتى الآن أي فارغا القياسية، وبروتوكولات موحدة الاستخدام السريري من الخلايا المكونة للدم دم الحبل السري. وفقا لأنفسهم الجذعية لا يتم التعرف على خلايا دم الحبل السري قانونا كمصدر للخلايا الجذعية المكونة للدم للزرع. وبالإضافة إلى ذلك، ليس هناك قواعد أخلاقية أو قانونية تنظم أنشطة وتنظيم ضفاف krovb السرة التي تتوفر في الخارج. وفي الوقت نفسه، من أجل سلامة زرع دم الحبل السري، وينبغي رصدها بعناية جميع العينات. قبل جمع عينة دم من امرأة حامل ، يجب الحصول على موافقتها. كل الحوامل يجب أن تدرس على عربة من إختبار المستضد السطحي لإلتهاب الكبد ب، والأجسام المضادة لفيروس التهاب الكبد C وفيروس نقص المناعة ومرض الزهري. يجب أن يتم اختبار كل عينة من دم الحبل السري على عدد قياسي من خلايا الأنوية وCD34 + القدرة على تشكيل مستعمرة. وعلاوة على ذلك، أجرت HBA الكتابة، ABO فصيلة الدم وعضويتها في عامل ره. هناك حاجة لإجراءات الاختبار المحاصيل على العقم الجرثومية والاختبار المصلي لHIV-1 و HIV-2 العدوى، إختبار المستضد السطحي لإلتهاب الكبد ب، والتهاب الكبد الوبائي، عدوى الفيروس المضخم للخلايا، NTLY NTLY-1 و-II، والزهري، وداء المقوسات. وبالإضافة إلى ذلك، للكشف عن الفيروس المضخم للخلايا والبلمرة HIV رد فعل وتنفيذها. ويبدو من المناسب لاستكمال تحليل بروتوكولات الاختبار السري HSCs دم الحبل السري لتحديد هذه الأمراض الوراثية مثل الثلاسيميا وفقر الدم المنجلي، الفوسفات نقص نازعة أمين، فقد غاماغلوبولين الدم بروتون، مرض Harlera والمقامر.

في المرحلة التالية من التحضير للزرع ، فإن السؤال المطروح هو الحفاظ على GSK. أخطر من أجل بقاء الخلايا عند إعدادها هي إجراءات التجميد والذوبان. عند تجميد الخلايا المكونة للدم ، يمكن تدمير جزء كبير منها بسبب تكوين البلورة. للحد من نسبة موت الخلية ، يتم استخدام مواد خاصة - cryoprotectants. في أغلب الأحيان ، يستخدم جهاز DMSO ، كبروتين حراري ، بتركيز نهائي قدره 10٪. ومع ذلك ، بالنسبة إلى DMSO ، يتميز هذا التركيز بتأثير سام للخلايا مباشرة ، والذي يتجلى حتى في ظل ظروف الحد الأدنى من التعرض. انخفاض تأثير السامة للخلايا من خلال المحافظة على درجة حرارة الصفر جامدة طريقة التعرض والامتثال تنظيم المواد المعالجة أثناء وبعد ذوبان (سرعة جميع التلاعب تطبيق إجراءات غسيل متعددة) تحققت. لا تستخدم تركيز DMSO أقل من 5٪ ، حيث أنه في هذه الحالة ، يحدث الموت الشامل للخلايا المكونة للدم خلال فترة التجمد.

وجود شوائب خلايا الدم الحمراء في خليط التعليق GSK يخلق خطر تطوير رد فعل عدم توافق مستضدات كرات الدم الحمراء. في نفس الوقت ، مع إزالة كريات الدم الحمراء ، يزداد بشكل ملحوظ فقدان الخلايا المكونة للدم. فيما يتعلق بهذا ، تم اقتراح إجراء لعزل GSK غير المجزأ. في هذه الحالة، لحماية خلايا الأنوية من الآثار الضارة لدرجات الحرارة المنخفضة باستخدام 10٪ محلول DMSO والتبريد بسرعة ثابتة (HS / دقيقة) ل-80 ° C، وبعد ذلك تم تجميد تعليق خلية في النيتروجين السائل. ويعتقد أنه باستخدام تقنية الحجب بالتبريد هذه ، يحدث تحلل جزئي للكريات الحمراء ، لذلك لا تتطلب عينات الدم تجزيئًا. قبل الزرع ، يتم إذابة تعليق الخلية ، وغسلها خالية من الهيموجلوبين و DMSO في محلول الزلال البشري أو المصل. الحفاظ على السلف المكونة للدم استخدام هذا الأسلوب هو أعلى في الواقع من بعد تجزئة دم الحبل السري، ولكن الخطر من المضاعفات الناجمة عن نقل من نقل-ABO غير متوافق من كرات الدم الحمراء المخزنة.

يمكن إنشاء نظام للبنوك لتخزين HSC واختبار عينات HSC حل المشاكل المذكورة أعلاه. ومع ذلك ، من الضروري تطوير معايير أخلاقية وقانونية لا تزال قيد المناقشة. قبل إنشاء شبكة مصرفية ، من الضروري اعتماد عدد من الأحكام والوثائق حول توحيد إجراءات أخذ العينات ، والتجزؤ ، والاختبار والكتابة ، والحفظ بالتبريد للمراقبة العالمية للغلاف الجليدي. يتمثل الشرط الإلزامي للتشغيل الفعال لمصارف GSK في تنظيم قاعدة كمبيوتر للتواصل مع سجلات الرابطة العالمية لرواد المانحين (WMDA) والبرنامج الوطني الوطني للتبرع بالجهات المانحة (NMDP).

بالإضافة إلى ذلك ، فمن الضروري لتحسين وتوحيد طرق توسيع HSC في المختبر ، في المقام الأول خلايا دم الحبل السري للدم. إن استنساخ دم الحبل السري HSC ضروري لزيادة عدد المستلمين المحتملين المتوافقين مع نظام HLA. بسبب كمية صغيرة من دم الحبل السري ، فإن كمية HSC الواردة فيه ، كقاعدة عامة ، غير قادرة على توفير إعادة تغذية نخاع العظم عند المرضى البالغين. في الوقت نفسه ، لإجراء عمليات زرع غير ذات صلة ، من الضروري الوصول إلى عدد كاف من عينات GSK النموذجية (من 10000 إلى 150000 لكل 1 مستلم).

زرع الخلايا المكونة للدم لا يلغي التعقيدات المصاحبة لزرع النخاع العظمي. يظهر التحليل أنه في زرع الخلايا الجذعية لدم الحبل السري ، تتشكل أشكال حادة من تفاعل "التطعيم مقابل المضيفة" الحاد في 23٪ ، وهي مزمنة في 25٪ من المتلقين. في المرضى الذين يعانون من مرض إيكولوبيولوجي تلاحظ تكرار الإصابة بسرطان الدم الحاد خلال السنة الأولى بعد زراعة دم الحبل السري في 26٪ من الحالات.

في السنوات الأخيرة ، تم تطوير أساليب زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم المحيطية بشكل مكثف. محتوى HSC في الدم المحيطي صغير جدا (هناك 1 GSK لكل 100000 خلية دم) ، أن عزلتها دون إعداد خاص لا معنى له. لذلك ، أعطيت المانحة سابقا دورة من تحفيز المخدرات من الإفراج عن خلايا نخاع العظام المكونة للدم في الدم. تحقيقا لهذه الغاية ، وتستخدم مثل هذه الأدوية غير الضارة مثل عامل سيكلوفوسفاميد ومحفز مستعمرة المحببة. ولكن حتى بعد إجراء تعبئة HSC في الدم المحيطي ، لا يتجاوز محتوى خلايا CD34 + الموجودة فيه 1.6٪.

لتعبئة HSC في العيادة ، C-CEC أكثر شيوعا ، والذي يتميز بالتحمل الجيد نسبيا ، باستثناء مظهر الألم تقريبا في العظام. تجدر الإشارة إلى أن استخدام فواصل الدم الحديثة يسمح لنا بكفاءة عزل أسلاف الجذعية من تكون الدم. ومع ذلك ، في حالات تكون الدم الطبيعية ، يجب إجراء 6 إجراءات على الأقل للحصول على عدد كاف من الخلايا الجذعية المكونة للدم ، مماثلة للقدرة الاستيعابية لملاط نخاع العظم. مع كل عملية من هذا القبيل ، فإن الفاصل يعالج 10-12 لتر من الدم ، مما قد يسبب نقص الصفيحات وقلة الكريات البيض. تشتمل عملية الفصل على إعطاء مادة مانعة للتخثر (سيترات الصوديوم) إلى المتبرع ، والتي لا تستبعد ، مع ذلك ، تنشيط تنشيط الصفائح الدموية أثناء الطرد المركزي خارج الجسم. هذه العوامل تخلق الظروف لتطوير المضاعفات المعدية والنزفية. هناك عيب آخر لهذه الطريقة يكمن في التباين الكبير في استجابة التعبئة ، والذي يتطلب مراقبة محتوى HSC في المتبرعين بالدم المحيطي ، وهو ضروري لتحديد أقصى مستوى لها.

زرع ذاتي من HSC ، على النقيض من allogeneic ، يستبعد تماما تطور رد فعل الرفض. ومع ذلك ، فإن العيب الكبير في زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم ، والذي يحد من طيف الدلائل على سلوكه ، هو احتمال كبير لإعادة تسريب خلايا استنساخ الخلايا اللوكيميا مع التطعيم. بالإضافة إلى ذلك ، فإن عدم وجود تأثير "التطعيم مقابل الورم" بوساطة مناعية يزيد بشكل كبير من تكرار تكرار الإصابة بأمراض الدم الخبيثة. ولذلك، فإن الطريقة الوحيدة للتخلص من الورم جذري للدم نسيلي واستعادة الدم بولكلونل العادي في متلازمة خلل التنسج النقوي هو العلاج الكيميائي المكثف مع زرع HSC خيفي.

ولكن حتى في هذه الحالة ، فإن العلاج لمعظم الأوباملاستوز يهدف فقط إلى زيادة وقت بقاء المرضى وتحسين نوعية حياتهم. وفقا لعدة دراسات كبيرة ، البقاء على قيد الحياة خالية من الأمراض لفترات طويلة بعد HSC زرع الطعم يتحقق في 40 ٪ من مرضى الفشل. عند استخدام الخلايا الجذعية من الأخوة المتوافقة مع HbA ، يتم ملاحظة أفضل النتائج في المرضى الصغار الذين لديهم تاريخ قصير من المرض ، وعدد خلايا الانفجار حتى 10٪ ، وعلم الوراثة الخلوية المواتية. لسوء الحظ ، فإن معدل الوفيات المرتبطة بإجراءات زرع الطلع HSC في المرضى الذين يعانون من أمراض myelodysplastic لا يزال مرتفعا (في معظم التقارير - حوالي 40 ٪). نتائج 10 عاما تعمل البرنامج القومي الامريكي للنخاع العظام تبرع (510 مرضى، ومتوسط العمر - 38 عاما) إلى أن بقاء خالية من المرض هو 29٪ في غضون عامين في احتمال ضعيف نسبيا الانتكاس (14٪). ومع ذلك ، فإن معدل الوفيات الناجم عن إجراء عملية زرع الطيف من GSC من متبرع غير متصل مرتفع للغاية ويصل إلى 54٪ خلال فترة عامين. تم الحصول على نتائج مماثلة في الدراسة الأوروبية (118 مريضا ، متوسط العمر 24 عاما ، 2 سنوات البقاء على قيد الحياة خالية من الانتكاس 28 ٪ ، وتكرار 35 ٪ ، وفيات 58 ٪).

عند القيام بدورات مكثفة من العلاج الكيميائي مع استعادة لاحقة من تكون الدم عن طريق الخلايا المكونة للدم المكونة للصفات ، غالباً ما تنشأ مضاعفات مناعية ودموية. من نواحٍ عديدة ، ترتبط بحقيقة أن مجموعات الدم في البشر هي موروثة بشكل مستقل عن جزيئات معقد التوافق النسيجي الكبير. لذلك ، حتى إذا كان المتبرع والمتلقي متوافقين مع مستضدات HLA الرئيسية ، فقد تحتوي كريات الدم الحمراء على نمط ظاهري مختلف. تخصيص "كبير" عدم التوافق عندما preexist في الضد المتلقي لمستضدات من الجهات المانحة خلايا الدم الحمراء، و "الصغير" عندما الأجسام المضادة المانحة لمستضدات خلايا الدم الحمراء للمتلقي. هناك حالات مزيج من حالات عدم التوافق "الكبيرة" و "الصغيرة".

نتائج تحليل مقارن للالفعالية السريرية من نخاع العظم والخلايا الجذعية المكونة للدم من ال allografts الدم السري في الأورام الخبيثة الدموية تشير إلى أن الأطفال زرع الطعم الخيفي GSK دم الحبل السري إلى خفض كبير في خطر رد فعل "الكسب غير المشروع مقابل المضيف"، ولكن هناك فترة أطول من استرداد العدلات والصفيحات ارتفاع معدل الوفيات بعد 100 يوم من الزرع.

جعلت دراسة أسباب الفتك المبكر من الممكن توضيح موانع لزراعة GSK عن طريق زرعها ، من بينها أهمها:

• التواجد في المتلقي أو المتبرع بإجراء اختبارات إيجابية للإصابة بعدوى الفيروس المضخم للخلايا (بدون إجراء معالجة وقائية) ؛
• مرض الإشعاع الحاد.
• وجود أو حتى الاشتباه في وجود عدوى فطرية في المريض (دون العلاج الوقائي المبكر مع الأدوية المبيدة للفطريات) ؛
• hemoblasts ، حيث تلقى المرضى العلاج لفترات طويلة مع تخرق الخلايا (بسبب احتمال ارتفاع السكتة القلبية المفاجئة وفشل الجهاز المتعدد) ؛
• زرع من المتبرعين HLA- غير متطابقة (دون الوقاية من رد فعل "المزارع ضد المضيف" الحادة من قبل السيكلوسبورين A) ؛
• التهاب الكبد الفيروسي المزمن C (بسبب ارتفاع خطر الإصابة بمرض انسداد في الكبد).

وبالتالي ، يمكن أن يسبب زرع GSK مضاعفات خطيرة ، والتي غالبا ما تؤدي إلى الموت. في فترة أوائل (تصل إلى 100 يوما بعد زرع) تشمل هذه المضاعفات المعدية، رد فعل حاد "الكسب غير المشروع مقابل المضيف"، رفض الزرع (neprizhivlenie HSC المانحة)، venookklyuzionnaya أمراض الكبد، وكذلك نظرا لسمية تكييف نظام، تلف الأنسجة، والتي ما يميز عالية معدل إعادة عرض (الجلد، بطانة الأوعية الدموية، ظهارة الأمعاء). وتشمل المضاعفات المتأخرة فترة ما بعد زرع الرد المزمن من "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" تكرار المرض الكامن، تأخر النمو عند الأطفال، وظيفة الإنجاب وضعف ومرض الغدة الدرقية العين.

في الآونة الأخيرة ، في اتصال مع ظهور المنشورات على اللدونة من خلايا نخاع العظام ، نشأت فكرة استخدام GSK لعلاج النوبات القلبية والأمراض الأخرى. على الرغم من أن بعض التجارب على الحيوانات تدعم هذا الاحتمال ، إلا أن الاستنتاجات حول مرونة خلايا نخاع العظام تحتاج إلى تأكيد. يجب أن يؤخذ هذا الظرف بعين الاعتبار من قبل هؤلاء الباحثين الذين يعتقدون أن الخلايا المزروعة في النخاع العظمي البشري يمكن تحويلها بسهولة إلى خلايا عضلة هيكلية ، عضلة القلب أو الجهاز العصبي المركزي. الفرضية القائلة بأن GSKs هي مصدر خلوي طبيعي لتجديد هذه الأجهزة يتطلب أدلة خطيرة.

على وجه الخصوص، نشرت النتائج الأولى لمحاكمة علنية العشوائية Belenkova V. (2003)، والذي يهدف - لدراسة تأثير C-SIS (أي تعبئة HSCs الدم ذاتي) على السريرية، والدورة الدموية وحالة عصبي هرموني المرضى الذين يعانون من معتدلة الى فشل القلب المزمن الشديد، وكذلك تقييم السلامة مع العلاج القياسي (مثبطات ACE، حاصرات بيتا، مدرات البول، جليكوسيدات القلب). أول نشر نتائج المؤلفين برنامج البحوث لاحظ أن الحجة الوحيدة لصالح O-CBP هي نتائج علاج مريض واحد من خلال العلاج مع هذا الدواء وجدت تحسنا لا جدال في جميع المعلمات السريرية والدورة الدموية. ومع ذلك، لم يتم تأكيد نظرية تعبئة HSCs إلى مجرى الدم تليها تجديد عضلة القلب في منطقة ما بعد احتشاء - حتى في المرضى الذين يعانون من ديناميات السريرية الإيجابية للتخطيط صدى القلب التوتر مع الدوبوتامين لم تكشف ظهور عضلة القلب قابلة للحياة في المناطق ندبة الحقل.

وتجدر الإشارة إلى أنه في الوقت الحاضر ، من الواضح أن البيانات التي تسمح بالتوصية بالعلاج الخلوي البديل عن الإدخال على نطاق واسع في الممارسة السريرية اليومية ليست كافية. A الأداء وضعت بشكل جيد ونوعي للدراسات سريرية لتحديد مدى فعالية الخيارات المختلفة لعلاج الخلايا على التجدد، ووضع مؤشرات وموانع لذلك، وكذلك مبادئ توجيهية بشأن الاستخدام المشترك للالتجدد والعلاج البلاستيك والعلاج الجراحي أو المحافظة التقليدية. حتى الآن، لا ردا على سؤال عن أي نوع من السكان من خلايا نخاع العظام (المكونة للدم الجذعية أو اللحمية) يمكن أن تؤدي إلى الخلايا العصبية والعضلية، وليس واضحا ما هي الشروط مساهمة في هذا في الجسم الحي.

يتم العمل في هذه المناطق في العديد من البلدان. في ملخص ندوة فشل الكبد الحاد المعاهد الوطنية الأميركية للصحة بين أساليب واعدة من العلاج، جنبا إلى جنب مع زراعة الكبد، وضع علامة زرع خلايا الكبد اتصال زينون أو خيفي وفي المفاعلات الحيوية المختبر مع خلايا الكبد. هناك دليل مباشر على أن الخلايا الكبدية الأجنبية النشطة وظيفيا فقط يمكنها تقديم دعم فعال لكبد المتلقي. من أجل الاستخدام السريري لخلايا الكبد المعزولة ، من الضروري إنشاء بنك للخلايا ، مما يقلل بشكل كبير من الوقت بين إطلاق الخلايا واستخدامها. الأكثر قبولا لإنشاء بنك من الخلايا الكبدية المعزولة هو الحفظ بالتبريد من خلايا الكبد في النيتروجين السائل. عند استخدام هذه الخلايا في العيادة في المرضى الذين يعانون من قصور الكبد الحاد والمزمن ، تم الكشف عن تأثير علاجي مرتفع.

على الرغم من النتائج المتفائلة والمشجعة لتطبيق زرع خلايا الكبد في التجربة والعيادة ، هناك العديد من المشاكل التي لا تزال بعيدة عن الحل. وتشمل هذه كمية محدودة من الهيئات المناسبة للحصول على خلايا الكبد معزولة أساليب فعالة بالقدر الكافي من الانفصال، وعدم وجود طرق موحدة للحفاظ على خلايا الكبد فهم غامض من آليات تنظيم نمو وانتشار الخلايا المزروعة، وعدم وجود كاف تقييم أساليب engraftment أو رفض خلايا الكبد الصنعية. وينبغي أن يشمل أيضا وجود مناعة زرع باستخدام خلايا خيفي أو xenogeneic، وإن كانت أقل مما كانت عليه في زرع الكبد مثلي، ولكن تتطلب تطبيق الأدوية المثبطة للمناعة، التغليف خلايا الكبد معزولة أو إنزيمات معالجة خاصة. غالبًا ما يؤدي زرع خلايا الكبد إلى صراع مناعي بين المتلقي والجهة المانحة كرد فعل رفض ، مما يتطلب استخدام التخلاء. أحد الحلول لهذه المشكلة هو استخدام وسائل الاعلام الصغيرة التي يسهل اختراقها البوليمر لعزل خلايا الكبد، مما يؤدي إلى تحسين بقائهم على قيد الحياة، لأن غشاء الكبسولة على نحو فعال يحمي خلايا الكبد، على الرغم من التحصين المضيف.

ومع ذلك، في الفشل الكبدي هذا زرع خلايا الكبد الحاد له تأثير بسبب الوقت الطويل بدلا اللازمة لengraftment من خلايا الكبد في البيئة الجديدة مع الوصول إلى الأداء الأمثل خطوة. وجود قيود المحتملة هو إفراز الصفراء زرع خارج الرحم من خلايا الكبد معزولة، وعند استخدام المفاعلات الحيوية حاجز الفسيولوجية أساسي يعمل التناقض بين الأنواع البروتينات البشرية والبروتينات التي تنتج خلايا الكبد xenogeneic.

في الأدب هناك تقارير تفيد بأن زرع المحلي من نخاع العظم خلايا انسجة الجذعية يسهل التصحيح الفعال للتشوهات العظام، واستعادة العظم في هذه الحالة هو أكثر كثافة مما كان عليه في تجديد الترميمي عفوية. في العديد من الدراسات قبل السريرية في النماذج الحيوانية وقد أثبتت بشكل مقنع إمكانية استخدام زرع الخلايا اللحمية نخاع العظام في جراحة العظام، على الرغم من أن لتحسين هذه الأساليب، حتى في أبسط الحالات، هناك حاجة إلى مزيد من العمل. على وجه الخصوص ، لم يتم العثور حتى الآن على الظروف المثلى لتوسيع الخلايا انسجة العظم خارج الجسم الحي ، وبنية وتكوين الناقل المثالي لها (مصفوفة) لا تزال غير مشغلة. لم يتم تحديد العدد الأدنى من الخلايا اللازمة لتجديد العظام بالجملة.

ثبت أن الخلايا الجذعية الوسيطة تظهر اللدونة transgermal - القدرة على التفريق في أنواع الخلوية التي لا ترتبط phenotypically إلى خلايا الخط الأصلي. تحت الظروف المثلى بولكلونل الخلايا الجذعية الثقافة خط خلايا انسجة نخاع العظام المحفوظة في المختبر لأكثر من 50 الانقسامات، الأمر الذي يجعل من الممكن الحصول على بلايين الخلايا اللحمية من 1 مل من نضح نخاع العظام. ومع ذلك، فإن عدد سكان الخلايا الجذعية الوسيطة التي تتميز عدم التجانس، الذي يتجلى التباين في الأحجام مستعمرة، وسرعات مختلفة من تشكيل والتنوع الصرفي من أنواع الخلايا - من الخلايا الليفية مثل المغزل على شكل خلايا مسطحة كبيرة. في غضون 3 أسابيع من زراعة الخلايا الجذعية اللحمية لوحظ عدم التجانس المظهري: مستعمرة واحدة تشكيل العقيدات من النسيج العظمي، والبعض الآخر - مجموعات من الخلايا الشحمية، وغيرها، وأكثر نادرة، وتشكيل الجزر من الغضروف.

لعلاج الأمراض التنكسية في الجهاز العصبي المركزي ، تم استخدام أول زرع للنسيج العصبي الجنيني لأول مرة. في السنوات الأخيرة ، بدلا من نسيج الدماغ الجنيني ، تم زرع خلايا من الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية العصبية (Poltavtseva ، 2001). تحتوي الخلايا العصبية على سلائف عصبية ملتزمة وعصب عصبي - وهذا يعطي الأمل في استعادة وظائف الدماغ المفقودة بعد زرعها. بعد زرع الخلايا لneurospheres علامة فرقت الجسم الفئران الجسم المخطط الدماغ انتشارها والتمايز في الخلايا العصبية الدوبامين، والذي يقضي التماثل السيارات في الفئران مع gemiparkinsonizmom التجريبية. ومع ذلك ، في بعض الحالات ، وضعت الخلايا السرطانية من خلايا العصبية ، مما أدى إلى وفاة الحيوانات (Bjorklund ، 2002).

الدراسة عيادة متأنية لمجموعتين من المرضى الذي لا المرضى ولا الأطباء عرف يراقبهم (مزدوجة التعمية)، أن مجموعة من المرضى زرعها الأنسجة الجنينية مع الخلايا العصبية التي تنتج الدوبامين، قامت مجموعة ثانية من المرضى خطوة خاطئة، أعطت نتائج غير متوقعة . المرضى الذين تم زرعهم بالأنسجة العصبية الجنينية لم يشعروا أفضل من مرضى المجموعة الضابطة. وعلاوة على ذلك، 5 من أصل 33 مريضا بعد 2 سنة بعد زرع الأنسجة العصبية الجنينية وضعت خلل الحركة المستمرة، والتي ليس لديها مجموعة من المرضى التحكم (الخلايا الجذعية: التقدم العلمي واتجاهات البحوث في المستقبل نات انست، الصحة USA ...). واحدة من المشاكل التي لم تحل من الدراسات السريرية لخلايا المخ الجذعية العصبية هو تحليل احتمالات حقيقية والقيود المفروضة على المشتقات زرع من أجل تصحيح اضطرابات الجهاز العصبي المركزي. فمن الممكن أن نوبة الصرع لفترات طويلة يتسبب neyronogenez في الحصين، مما يؤدي إلى تغييرات هيكلية وظيفية لها قد يكون عاملا في التطوير التدريجي للصرع. يستحق مثل هذا الاستنتاج اهتماما خاصا ، لأنه يشير إلى عواقب سلبية محتملة لتوليد خلايا عصبية جديدة في الدماغ الناضج وتشكيل روابط متشابكة شاذة.

لا ينبغي أن ننسى أن الزراعة في البيئات مع السيتوكينات (mitogens) تقارب خصائص الخلايا الجذعية لخلايا الخلايا السرطانية ، حيث تحدث تغيرات قريبة في تنظيم دورات الخلايا التي تحدد القدرة على التقسيم غير المقيد. من الحمق أن يتم زرع مشتقات الإنسان المبكرة للخلايا الجذعية الجنينية ، حيث أن التهديد بتطور الأورام الخبيثة في هذه الحالة كبير جدا. إنه أكثر أماناً لاستخدام ذريتهم الأكثر التزاماً ، أي الخلايا السلفية ذات الخطوط المتباينة. ومع ذلك ، في الوقت الحالي لم يتم بعد التوصل إلى تقنية موثوق بها للحصول على خطوط خلايا بشرية مستقرة تمازج في الاتجاه الصحيح.

إن استخدام تقنيات البيولوجيا الجزيئية لتصحيح الأمراض الوراثية والأمراض البشرية بمساعدة تعديل الخلايا الجذعية له أهمية كبيرة في الطب العملي. تمكّن خصائص جينوم الخلايا الجذعية من تطوير مخططات زرع فريدة بهدف تصحيح الأمراض الوراثية. ولكن في هذا الاتجاه ، هناك أيضًا عدد من القيود التي يجب التغلب عليها قبل أن يبدأ التطبيق العملي للهندسة الوراثية للخلايا الجذعية. بادئ ذي بدء ، فمن الضروري لتحسين عملية تعديل جينوم الخلايا الجذعية خارج الجسم الحي. من المعروف أن تكاثر الخلايا الجذعية لفترة طويلة (3-4 أسابيع) يقلل من ترنسفكأيشن ، لذلك تعد دورات عديدة من ترنسفكأيشن ضرورية لتحقيق مستوى عالٍ من تعديلها الجيني. ومع ذلك ، فإن المشكلة الرئيسية مرتبطة بمدة التعبير عن الجين العلاجي. حتى الآن ، في أي من الدراسات ، لم تتجاوز فترة التعبير الفعال بعد زرع الخلايا المعدلة أربعة أشهر. في 100 ٪ من الحالات مع مرور الوقت ، يتم تقليل التعبير عن الجينات المورثة عن طريق الترقيع بسبب تعطيل المروجين و / أو موت الخلايا مع الجينوم المعدل.

مشكلة مهمة هي تكلفة استخدام التقنيات الخلوية في الطب. على سبيل المثال ، فإن متطلبات التمويل السنوي المقدرة للنفقات الطبية لقسم زرع نخاع العظم فقط ، والمصممة لأداء 50 عملية زراعة كل عام ، تبلغ حوالي 900،000 دولار.

إن تطوير التقنيات الخلوية في الطب السريري عملية معقدة ومتعددة المراحل تنطوي على تعاون بنّاء من المراكز العلمية والسريرية متعددة التخصصات والمجتمع الدولي. في الوقت نفسه ، يتم إيلاء اهتمام خاص للمنظمة العلمية للبحوث في مجال العلاج بالخلايا. وأهمها تطوير بروتوكولات للتجارب السريرية ، ومراقبة صحة البيانات السريرية ، وتكوين سجل وطني للبحوث ، والاندماج في البرامج الدولية للتجارب السريرية متعددة المراكز ، وإدخال النتائج في الممارسة السريرية.

الختامية مقدمة القضايا زرع الخلايا، أود أن أعرب عن الأمل بأن الجهود المشتركة من كبار الخبراء في أوكرانيا من مختلف مجالات العلوم سيضمن إحراز تقدم كبير في الدراسات التجريبية والسريرية وسوف تسمح في السنوات القادمة لإيجاد طرق فعالة لمساعدة الناس المصابين بأمراض خطيرة في حاجة إلى زرع الأعضاء والأنسجة والخلايا.

[13], [14], [15], [16], [17], [18]