الخلايا الجذعية المكونة للدم

وتتميز الخلايا الجذعية المكونة للدم (HSCs)، والخلايا الاولية الوسيطة التي كتبها multipotency وتؤدي إلى خطوط الخلايا، العناصر المحددة التي تشكل خلايا الدم وبعض خلايا الأنسجة المتخصصة في الجهاز المناعي.

فرضية وجود سلف مشترك لجميع خلايا الدم، فضلا عن "الخلية الجذعية" على المدى، التي يملكها A. ماكسيموف (1909) وتشكيل محتمل من كتلة الخلية من GSK ضخمة - العظام خلايا نخاع الجذعية تنتج خلايا يوم 10TH التي تشكل كريات الدم الطرفية نفسه. تأسست وجود الخلايا الجذعية المكونة للدم في عام 1961 في تجارب على التعافي من الدم في الفئران تلقى جرعة مميتة من التعرض للإشعاع الذي يدمر خلايا نخاع العظم الجذعية. بوس أي زرع خلايا نخاع العظام مسانج حتى المشع القاتلة الحيوانات تم الكشف عن بؤر منفصلة من الدم في الطحال من المتلقين الذين المصدر - واحدة الخلايا الاولية مولد الرمع.

ثم ، أظهرت قدرة الخلايا الجذعية المكونة للدم على الدعم الذاتي ، والتي توفر وظيفة تكون الدم خلال مرحلة ما قبل الصيام. في عملية التطور الجنيني ، تتميز HSCs بنشاط هجرة مرتفع ، وهو أمر ضروري لترحيلها إلى مواقع الأعضاء المكونة للدم. يتم الاحتفاظ هذه الخاصية من HSCs أيضا في ontogenesis - بسبب هجرتهم المستمرة ، يحدث التجديد الدائم للمجموعة من الخلايا مناع المناعة. قدرة GSK الهجرة واختراق الحواجز الدم الأنسجة، شريطة زرع في نمو الأنسجة ومولد الرمع الأساس لخلايا زرع نخاع العظم في عدد من الأمراض المرتبطة اضطرابات الجهاز المكون للدم.

مثل جميع موارد الخلايا الجذعية ، الخلايا الجذعية المكونة للدم موجودة في مكانها (نخاع العظم) بكميات صغيرة جدا ، مما يسبب صعوبات معينة في تخصيصها. تتميز HSCs الإنسان Immunophenotypic باسم خلايا CD34 + NK قادرة على الهجرة إلى مجرى الدم واستعمار أجهزة نظام المناعة أو لإعادة ملء سدى نخاع العظام. فمن الضروري أن نفهم بوضوح أن GSK ليست خلايا نخاع العظام أكثر غير ناضجة، ومستمدة من السلائف، والتي تشمل dormantnye الخلايا الليفية SB34 سلبية. وجد أن الخلايا مع النمط الظاهري من CD34 قادرة على دخول مجرى الدم، حيث تغيير النمط الظاهري في CD34 +، ولكن عودة المهاجرين في نخاع العظام تحت تأثير المكروية تصبح مرة أخرى عناصر الخلايا الجذعية-CD34 السلبي. في حالة عدم الراحة ، لا تستجيب الخلايا CD34 إلى الإشارات التنظيمية اللحمية للباراكرين (عوامل النمو ، السيتوكينات). ومع ذلك، في الحالات التي تتطلب التضخيم كثافة الخلايا الجذعية المكونة للدم مع CD34 النمط الظاهري الاستجابة لإشارات التمايز تشكل كلا المكونة للدم والخلايا الاولية الوسيطة. ويتم الدم خارج عن طريق الاتصال المباشر مع عناصر GSK الخلوية سدى نخاع العظام قدمت شبكة معقدة من الضامة، والخلايا البطانية الشبكية، بانيات، الخلايا الليفية اللحمية والمصفوفة خارج الخلية. عظم إطار نخاع انسجة - وليس فقط مصفوفة أو "الهيكل العظمي" لالأنسجة المكونة للدم، فإنه يحمل تنظيم جيد من الدم بسبب الإشارات التنظيمية نظير الصماوي من عوامل النمو، السيتوكينات و chemokines، ويوفر أيضا التفاعلات لاصقة اللازمة لتكوين خلايا الدم.

وهكذا ، فإن أساس نظام مكوّن الدم المتطور باستمرار هو خلية جذعية قابلة للدم ، قادرة على الاستمرار في الصيانة الذاتية لفترات طويلة. خلال عملية الالتزام ، تخضع الخلايا الجذعية السرطانية (HSCs) للتفاضل الأساسي وتشكل استنساخًا لخلايا تختلف في خصائصها الخلوية وخصائصها المناعية. اكتمال تشكيل متوالي من الخلايا السلفية البدائية وملتزمة من خلال تشكيل الخلايا سلف التعرف عليها شكليا من مختلف خطوط المكونة للدم. نتيجة للمراحل اللاحقة عملية متعددة المراحل المعقدة هو نضوج الخلايا المكونة للدم والعائد ناضجة إلى الدم المحيطي عناصر شكلت - كريات الدم الحمراء، كريات الدم البيضاء، الصفائح الدموية اللمفية و.

[1], [2], [3],

مصادر الخلايا الجذعية المكونة للدم

تعتبر الخلايا الجذعية المكونة للدم مصدر الجذع الأكثر دراسة ، والذي يرجع إلى حد كبير إلى استخدامها في العيادة لزرع نخاع العظام. للوهلة الأولى ، يعرف الكثير عن هذه الخلايا. إلى حد ما هذا صحيح، لأن أحفاد المتوسطة وناضجة GSK - العناصر الخلوية أكثر بأسعار معقولة، كل منها (كريات الدم الحمراء، كريات الدم البيضاء، الخلايا الليمفاوية، وحيدات / الضامة والصفائح الدموية) ودراسة وافية على جميع المستويات - من الضوء إلى الإلكترون المجهري، من الخصائص البيوكيميائية و immunophenotypic قبل تحديد بواسطة تحليل PCR. ومع ذلك، قام مراقبة من قبل الصرفي، التركيبية، والكيمياء الحيوية، immunophenotypic، والخواص الفيزيائية الحيوية الجيني GSK لم تسفر عن إجابات للعديد من القضايا الإشكالية، والحل الذي هو ضروري لتطوير زراعة الخلايا. لا يزال لم يثبت آليات الاستقرار GSK في حالة سبات، يتم تنشيطها، أدخل مرحلة من مراحل تقسيم متناظرة أو غير متناظرة، والأهم من ذلك - الالتزام التعليم باعتباره خلايا مختلفة وظيفيا في الدم، وخلايا الدم الحمراء، كريات الدم البيضاء، الخلايا الليمفاوية، والصفائح الدموية.

وأثار وجود في خلايا نخاع العظام مع النمط الظاهري من CD34، وهي أسلاف كل من الوسيطة والمكونة للدم الخلايا الجذعية مسألة وجود أقرب بالقرب من الخلايا CD34 سلبيا في تمايز الخلايا السلف وخط انسجة المكونة للدم. بواسطة طريقة ثقافة طويلة الأجل ، تم الحصول على ما يسمى بالخلية طويلة الأجل لبدء الثقافة (LTC-IC). عمر هذه الخلايا الاصلية في تشكيل مستعمرة نشاط انسجة نخاع العظم على أساس مزيج من عوامل النمو أكثر من 5 أسابيع، في حين أن الجدوى من وحدات ملتزمة تشكيل مستعمرة (كفو) في ثقافة سوى 3 أسابيع. ويعتقد حاليا أن LTC-IC - التناظرية وظيفية GCW كما تتميز repopulyatsionnom في قدرة عالية من حوالي 20٪ LTC-IC من النمط الظاهري CD34 + CD38- وتظهر قدرة عالية على التجديد الذاتي. مثل هذه الخلايا الموجودة في النخاع العظمي البشري مع وتيرة 1:50 000. ومع ذلك، فإنه ينبغي الاعتراف-limfoidoinitsiiruyuschie النخاعي الخلايا الأقرب إلى HSC التي يتم الحصول عليها في ظل ظروف طويلة الأجل (15 أسبوعا) الثقافة. تصنف هذه الخلايا كما LTC، بين خلايا نخاع عظام بشرية وجدت في أقل 10 مرات من LTC-IC، ويتم تشكيل بمثابة خطوط الخلايا الجذعية الدم النخاعي والمكون للدم اللمفاوية.

على الرغم من أن الخلايا الجذعية المكونة للدم وضع العلامات مع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، تليها تحديد immunophenotypic هو الأسلوب الرئيسي لتحديد والفرز الانتقائي للخلايا الجذعية المكونة للدم مع الاستخدام السريري المحتمل للمخصص GSK محدودا. منع CD34 الأجسام المضادة لمستقبلات أو غيرها من المضادات علامة أثناء فرز immunopositive حتما يغير خصائص خلايا معزولة معها. والأفضل هو إفراز HSC المناعي سلبيًا على الأعمدة المغناطيسية. ومع ذلك، في هذه الحالة، وعادة ما يستخدم الفرز الاجسام المضادة، ثابتة على دعم المعدن. أيضا، والأهم، فإن كلا من طريقة توزيع GSK على أساس المظهرية، بدلا من الخصائص الوظيفية. لذلك، يفضل العديد من الباحثين لاستخدام تحليل المعلمات مولد الرمع GSK، الذي يسمح للحجم وتكوين المستعمرات لتحديد درجة من النضج واتجاه تمايز الخلايا الاصلية. ومن المعروف أنه في عملية ارتكاب عدد من الخلايا وعدد من الأنواع في المستعمرات هو انخفاض. الخلايا الجذعية المكونة للدم والخلايا ابنة في وقت مبكر، ودعا "وحدة الوحيدات-megakariotsitokolonieobrazuyuschaya-محببة كرات الدم الحمراء" (SFU-GEMM)، وخلق ثقافة multilinear مستعمرات كبيرة تحتوي على التوالي، المحببة، الكريات الحمراء، وحيدات الخلايا السوية العرطلة. وتقع أسفل وحدة خط محببة-نسب التزام monotsitokolonieobrazuyuschaya (SFU-GM) يولد مستعمرات المحببة والضامة، ومستعمرة المحببات (SFU-G) - فقط مستعمرات صغيرة من المحببة ناضجة. في وقت مبكر كرات الدم الحمراء سلف - وحدة burstoobrazuyuschaya من خلايا الدم الحمراء (SFU-E) - هو مصدر الحمراء مستعمرة كريات الدم حدة كبيرة وأكثر نضجا تشكيل (SFU-E) - الحمراء الصغيرة مستعمرات خلايا الدم. في عموم السكان، مع نمو الخلايا في وسائل الإعلام نصف صلبة يمكن تحديد الخلايا التي تشكل ستة أنواع من المستعمرات الدم النخاعي: SFU-GEMM، GM-SFU، SFU-G، M-SFU، VFU-E و E-SFU).

ومع ذلك ، بالإضافة إلى المشتقات المكونة للدم ، فإن أي مادة مصدر لفصل HSC تحتوي على عدد كبير من الخلايا المصاحبة. في هذا الصدد ، من الضروري إجراء تنقية أولية لعملية زرع الخلايا النشطة في الجهاز المناعي للمتبرع ، أولاً وقبل كل شيء. عادة ، يتم استخدام المناعة المستندة على تعبير لمفاوي من مستضدات معينة لهذا ، مما يجعل من الممكن عزل وإزالتها باستخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. وبالإضافة إلى ذلك، وهي تقنية immunorozetochnaya T-اللمفاويات المنضب زرع نخاع العظام، والذي يقوم على أساس تشكيل المجمعات من CD4 + الخلايا الليمفاوية والاجسام المضادة المحددة إزالتها بكفاءة باستخدام فصادة. توفر هذه التقنية مادة الخلية المنقى مع 40-60 ٪ الخلايا الجذعية المكونة للدم.

زيادة عدد الخلايا الاولية بسبب إزالة خلايا الدم الناضجة من منتج فصادة الكريات البيض ويتحقق عن طريق الطرد المركزي المعاكس تليها الترشيح (في وجود خالب - سترات الصوديوم) من خلال عمود يحتوي على ألياف النايلون المغلفة مع الغلوبولين المناعي البشري. التطبيق المتناسق لهذين الأسلوبين يضمن التطهير الكامل للزرع من الصفائح الدموية ، 89٪ من كريات الدم الحمراء و 91٪ من خلايا الدم البيضاء. بسبب انخفاض كبير في خسائر HSC ، يمكن زيادة مستوى الخلايا CD34 + في إجمالي كتلة الخلايا إلى 50 ٪.

بالنسبة للخصائص الوظيفية للخلايا الجذعية المكونة للدم ، يتم استخدام قدرتها على تكوين مستعمرات من عناصر الدم الناضجة في الثقافة. إن تحليل المستعمرات المشكلة يجعل من الممكن تحديد وتحديد أنواع الخلايا السلف ، ودرجة الثقة بينها ، وتحديد اتجاه تمايزها. يتم تحديد نشاط Clonogenic في الوسائط شبه الصلبة على methylcellulose أو agar أو البلازما أو هلام الفيبرين ، مما يقلل من نشاط هجرة الخلايا ، مما يمنع من تعلقها بسطح الزجاج أو البلاستيك. في ظل الظروف المثلى للثقافة ، تتطور الحيوانات المستنسخة من خلية واحدة خلال 7-18 يومًا. إذا كان هناك أقل من 50 خلية في الاستنساخ ، يتم تعريفها على أنها كتلة واحدة ، إذا كان عدد الخلايا يتجاوز 50 - كمستعمرة. يؤخذ بعين الاعتبار عدد الخلايا القادرة على تكوين مستعمرة (وحدات تشكيل مستعمرة - خلايا CFU أو خلايا تشكيل مستعمرات - COCs). وتجدر الإشارة إلى أن المعلمات من CFU و COC لا تتوافق مع كمية HSC في تعليق الخلية ، على الرغم من أنه يرتبط معها ، مما يؤكد مرة أخرى على الحاجة إلى تحديد النشاط الوظيفي (تشكيل مستعمرة) HSC في المختبر.

من بين خلايا النخاع العظمي ، تمتلك الخلايا الجذعية المكونة للدم أعلى إمكانات التكاثر ، والتي تتشكل بسببها أكبر المستعمرات في الثقافة. من خلال عدد من هذه المستعمرات ، يقترح تحديد عدد الخلايا الجذعية بشكل غير مباشر. بعد تشكيل مستعمرات في المختبر تتجاوز 0.5 ملم وقطرها مع عدد الخلايا 1000، لقد اختبرت المؤلفين استقرار هذه الخلايا إلى شبه مميتة جرعة من 5 فلورويوراسيل وفحص قدرتها على إعادة ملء نخاع العظام قاتل الحيوانات المعرضة للإشعاع. ووفقًا لهذه المعايير ، لم تختلف الخلايا المنعزلة كثيرًا عن HSC وحصلت على رمز الاختصار HPP-CFC - وهي خلايا تشكل مستعمرة ذات إمكانات عالية للتكاثر.

يستمر البحث عن إمكانية اختيار نوعية أكثر من الخلايا الجذعية المكونة للدم. ومع ذلك ، فإن الخلايا المكونة للدم الجذعية تشبه إلى حد ما الخلايا الليمفاوية وتمثل مجموعة متجانسة نسبيا من الخلايا مع نوى دائرية تقريبا ، لونين مشتت بدقة وكمية صغيرة من السيتوبلازم ضعيف القاع. من الصعب تحديد الرقم الدقيق. من المفترض أن GSK في نخاع العظم لشخص يحدث مع تكرار 1 من كل 106 الخلايا التي تحتوي على النواة.

تحديد الخلايا الجذعية المكونة للدم

لتحسين التعرف على الخلايا الجذعية المكونة للدم ونفذت بشكل متتالي أو في وقت واحد (على تيرى لصوربيتان متعددة) بحث membrannosvyazannyh الطيف المضادات، التي GSK النمط الظاهري CD34 + CD38 وينبغي أن يقترن مع عدم وجود علامات التمايز الخطية، ولا سيما مستضدات الخلايا مناعيا مثل CD4، والمناعية السطح glycophorin.

عمليا جميع مخططات phenotyping للخلايا الجذعية المكونة للدم تشمل تحديد مستضد CD34. هذا بروتين سكري ذي الوزن الجزيئي حوالي 110 كيلو دالتون، أعربت تحمل عدة مواقع بالغليكوزيل على غشاء الخلية البلازما بعد تفعيل هذا الجين المحلية على الكروموسوم 1. ترتبط وظيفة جزيء CD34 بتفاعل L-selectin-mediated للخلايا الأولية المكونة للدم مع قاع قاعدة نخاع العظم. ومع ذلك، ينبغي أن نتذكر أن وجود CD34 مستضد على سطح الخلية يسمح فقط إجراء تقييم أولي للمحتوى GSK في تعليق الخلية، ويتم التعبير عن ذلك، وغيرها من الخلايا الاصلية المكونة للدم والخلايا اللحمية نخاع العظم والخلايا البطانية.

خلال تمايز الخلايا السلية المكونة للدم ، يتم تقليل تعبير CD34 بشكل دائم. ارتكبت خلايا كريات الدم الحمراء ، المحببة وحيدة الخلية الخلايا السلفية إما مستضد CD34 مستضد ضعيف ، أو أنها غائبة على سطحها على الإطلاق (النمط الظاهري CD34). على الغشاء السطحي للخلايا المتمايزة من نخاع العظم وخلايا الدم الناضجة ، لم يتم اكتشاف مستضد CD34.

وتجدر الإشارة إلى أنه في ديناميات تمايز الخلايا الاصلية المكونة للدم لا يقلل من مستوى التعبير عن CD34، ولكن بالتوازي مع زيادة تدريجية تعبير عن CD38 مستضد - لا يتجزأ بروتين سكري غشاء مع الوزن الجزيئي 46 كيلو دالتون وجود NAD-glikogidrolaznoy والنشاط محلقة ADP-ريبوزيل، مما يشير إلى مشاركتها في النقل والتوليف من ADP-ribose. وبالتالي ، هناك إمكانية للتحكم المزدوج في درجة ارتكاب الخلايا السلية المكونة للدم. سكان الخلايا التي تحتوي على النمط الظاهري CD34 + CD38 +، 90-99٪ خلايا نخاع العظام CD34 إيجابي يضم الخلايا الاصلية مع يقتصر التكاثري التمايز المحتملين و، في حين مع النمط الظاهري الخلايا CD34 + CD38 يمكن أن يدعي دور GSK.

في الواقع ، يحتوي عدد خلايا نخاع العظم الموصوفة في الصيغة CD34 + CD38- على عدد كبير نسبيًا من الخلايا الجذعية البدائية التي يمكن أن تفرق في اتجاهات النخاعي والليمفاوي. في سياق زراعة على المدى الطويل مع النمط الظاهري للخلايا CD34 + CD38- يتمكن من الحصول على جميع خلايا الدم الناضجة: العدلات، الحمضات، الخلايا القاعدية، وحيدات، السوية العرطلة، كريات الدم الحمراء والخلايا الليمفاوية.

نسبيا في الآونة الأخيرة وجدت أن خلايا CD34 إيجابي تعبر عن اثنين من أكثر علامة - AC133 وCD90 (خاصتك-1)، والتي تستخدم أيضا لتحديد الخلايا الجذعية المكونة للدم. ويشترك في اعرب خاصتك 1 المستضد مع مستقبلات CD117 (ج طقم) على CD34 + الخلايا من نخاع العظم والنخاع والدم المحيطي. هذا السطح fosfatidilinozitolsvyazyvayuschy بروتين سكري مع الوزن الجزيئي لل25-35 كيلو دالتون التي تشارك في عمليات التصاق الخلية. يعتقد بعض المؤلفين أن مستضد Thy-1 هو علامة الخلايا غير الناضجة CD34 الإيجابية. تولد الخلايا ذاتية التكاثر مع النمط الظاهري CD34 + Thy-1 + خطوطًا طويلة المدى مع تكوين خلايا ابنة. ومن المفترض أن الكتل مستضد خاصتك-1 الإشارات التنظيمية التي تسبب الانقسام توقف الخلية. على الرغم من حقيقة أن الخلايا CD34 + Tu1 + قادرة على تجديد الذات وإنشاء خطوط مثقف على المدى الطويل، النمط الظاهري لا يمكن أن تتصل فقط على شهادة الثانوية العامة، وخاصتك-1 + المحتوى في الوزن الكلي للعناصر خلية CD34 إيجابي حوالي 50٪، وهو ما يتجاوز بكثير عدد الخلايا المكونة للدم.

أكثر واعدة لتحديد الخلايا الجذعية المكونة للدم هو AC133 ، وهو عبارة عن علامة مستضد لخلايا طليعة تكون الدم ، تم الكشف عن التعبير عنها لأول مرة في خلايا الكبد الجنينية. AC133 هو بروتين سكري عبر الغشاء يظهر على سطح الغشاء الخلوي في المراحل المبكرة من النضج GSK - من الممكن أنه حتى قبل CD32 المضاد. في الدراسات التي أجريت على A. Petrenko و V. Grishchenko (2003) ، وجد أن AC133 يعبر عن 30٪ من خلايا CD34 الإيجابية للكبد الجنيني.

وهكذا، فإن الشخصية المثالي المظهري من الخلايا الجذعية المكونة للدم التي كتبها مفاهيم اليوم، مبلغ من مخطط الخلية، في الدوائر التي يجب أن تكون CD34 الحالي المستضدات التكوين، AC133 وخاصتك-1 ولكن لا يوجد مكان للتوقعات الجزيئي CD38، HLA-DR وعلامات التمايز الخطي GPA و CD3 و CD4 و CD8 و CD10 و CD14 و CD16 و CD19 و CD20.

قد يكون GSK المظهرية الاختلاف صورة مزيج من CD34 + CD45RalowCD71low، منذ خصائص الخلايا التي وصفها هذه الصيغة لا تختلف عن المعايير الوظيفية للخلايا مع النمط الظاهري CD34 + CD38. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن التعرف على GSK البشري من خلال العلامات النمطية لـ CD34 + Thy-1 + CD38Iow / 'c-kit / low - فقط 30 من هذه الخلايا تستعيد تماما تكون الدم في الفئران المشععة.

من تحليل الخصائص المظهرية العامة للخلايا نخاع العظام التي في الواقع 40 عاما من البحث المكثف GSK في وقت واحد قادر على حد سواء تجديد الذات والتمايز إلى العناصر الخلوية الأخرى، مما يتيح لتبرير استخدام زرع نخاع العظام لعلاج أمراض مختلفة من النظام المكون للدم. الأنواع الجديدة المكتشفة حديثًا من الخلايا الجذعية لم يتم استخدامها على نطاق واسع في الممارسة السريرية. ومع ذلك، والخلايا الجذعية من الحبل السري (الحبل) في الدم والكبد الجنين يمكن أن تتوسع بشكل ملحوظ زرع الخلايا ليس فقط في الدم، ولكن أيضا في مجالات أخرى من مجالات الطب، كما تختلف عن شهادة الثانوية العامة نخاع العظام والخصائص الأداء والجودة الكمية.

عادة ما يتم الحصول على حجم كتلة الخلايا الجذعية المكونة للدم اللازمة للزرع من نخاع العظام ودماء الأطراف والحبل السري ، وكذلك من الكبد الجنيني. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن الحصول على خلايا سلف الخلايا المكونة للدم في المختبر من خلال نشر المجالس الاقتصادية والاجتماعية متبوعًا بتمايزها الاتجاهي في عناصر الخلايا المكونة للدم. A. بترينكو، V. Grishchenko (2003) نقطة بحق فروق ذات دلالة إحصائية الخصائص المناعية والقدرة على استعادة الدم GSK أصل مختلف، نظرا لنسبة غير متكافئة الواردة في مصادرها من المحفزة في وقت مبكر والأسلاف في وقت لاحق ملتزمة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الخلايا الجذعية المكونة للدم المشتقة من مصادر جذعية مختلفة لها ارتباطات مختلفة تمامًا للخلايا غير المكونة للدم من الناحية الكمية والنوعية.

المصدر التقليدي للخلايا الجذعية المكونة للدم هو نخاع العظام. يتم الحصول على تعليق من خلايا نخاع العظام من عظم البطن أو القص عن طريق الترشح تحت التخدير الموضعي. إن المعلق الذي يتم الحصول عليه هو متجانس ويحتوي على خليط من HSC وعناصر خلية انسجة وخلايا سلفية ملتزمة للخطوط النخاعية والليمفاوية ، بالإضافة إلى عناصر الدم الناضجة. عدد الخلايا مع phenotypes CD34 + و CD34 + CD38 بين خلايا نخاع عظم النواة العظمية هو 0.5 إلى 3.6 و 0 إلى 0.5 ٪ ، على التوالي. يحتوي الدم المحيطي بعد تعبئة HSC المستحثة لـ HSC على 0.4-1.6٪ من CD34 + و 0-0.4٪ من CD34 + CD38.

تم الكشف عن و0-0،6 OD-2.6٪، والحد الأقصى عددهم بين خلايا الكبد الجنين للدم - - نسبة مئوية أعلى من الخلايا التي تحتوي على CD34 + CD38 نمط ظاهري مناعي وCD34 + دم الحبل السري و2،3 0،2-12،5 -35.8٪ على التوالي.

ومع ذلك، فإن نوعية المواد الكسب غير المشروع لا يتوقف فقط على مبلغ الواردة فيه من CD34 + الخلايا، ولكن أيضا على نشاطهم الوظيفي، التي يمكن تقدير مستوى تشكيل مستعمرة في الجسم الحي (إعادة تعمير نخاع في الحيوانات المعرضة للإشعاع قاتل) وفي المختبر - نمو المستعمرات على وسائل الإعلام نصف صلبة . وقد تبين أن مستعمرة تشكيل والنشاط التكاثري من الخلايا الاصلية مكونة للدم مع النمط الظاهري CD34 + CD38 HLA-DR، معزولة عن كبد الجنين، ونخاع العظام الجنين ودم الحبل السري، وتتجاوز كثيرا قدرة التكاثري من الخلايا المكونة للمستعمرة المكونة للدم من نخاع العظام والدم المحيطي من شخص بالغ. وكشف التحليل الكمي والنوعي HSC من أصل مختلف اختلافات كبيرة في كل من المحتوى النسبي في تعليق الخلية والقدرات الوظيفية. تم العثور على الحد الأقصى لعدد الخلايا + CD34 (24.6 ٪) في مواد الزرع التي تم الحصول عليها من نخاع العظام الجنين. يحتوي نخاع العظم لبشر بالغ على 2.1٪ من عناصر الخلية الموجبة CD34. بين الخلايا وحيدة النواة من الكبار البشري الدم المحيطي 0.5٪ فقط لديهم النمط الظاهري CD34 +، في حين أن دم الحبل السري تصل قيمتها 2٪. وبالتالي تشكيل مستعمرة قدرة CD34 + خلايا نخاع العظام الجنين بنسبة 2.7 مرات تفوق قدرة النمو نسيلي من نخاع العظام المكونة للدم من الخلايا البشرية البالغة وخلايا دم الحبل السري شكل مستعمرات أكبر بكثير من العناصر المكونة للدم معزولة من الدم المحيطي من البالغين: 65،5 حتي 40 و ، 8 مستعمرات / 105 خلايا ، على التوالي.

الاختلافات في النشاط التكاثري والقدرة على تشكيل مستعمرة للخلايا الجذعية المكونة للدم لا ترتبط فقط بدرجات مختلفة من نضجها ، ولكن أيضا مع البيئة المكروية الطبيعية. ومن المعروف أن كثافة الانتشار وتمايز الخلايا الجذعية بسرعة تحددها تأثير تنظيمي لا يتجزأ من نظام متعدد العناصر من عوامل النمو والسيتوكينات التي تنتجها كل من الخلايا الجذعية والعناصر الخلوية من المكروية مصفوفة اللحمية. استخدام السكان الخلية المنقى وسائل الإعلام الحرة المصل بهدف ثقافة خلية إعطاء عوامل النمو اتسم ذلك يكون لها التأثيرات المحفزة والمثبطة على الخلايا الجذعية من مختلف المستويات، الخلايا الاولية وخلايا ارتكبت في اتجاه خطي معين. تشير نتائج الدراسات التي أجريت إلى أن GSK ، التي تم الحصول عليها من مصادر ذات مستويات مختلفة من التطور الوراثي ، تختلف من النمط الظاهري والوظيفي. ل GSK ، والبقاء في المراحل المبكرة من تطور الجنين ، تتميز إمكانية عالية للتكاثر الذاتي والنشاط التكاثري عالية. تتميز هذه الخلايا بطول تيلومير أطول وتتعرض للارتكاب مع تكوين جميع خطوط الخلايا المكونة للدم. تأخر رد فعل الجهاز المناعي إلى المنشأ الجنيني HSC ، لأن هذه الخلايا تعبر عن جزيئات HLA أقل ما يقال. هناك تدرج واضح لمضمون النسبي للHSCs وقدرتها على تجديد الذات وعدد من خطوط أنها تشكل أنواع من الالتزام: CD34 + خلايا الكبد الجنين> CD34 + خلايا دم الحبل السري> CD34 + الخلايا من نخاع العظام. ومن المهم أن هذه الاختلافات ليست فريدة من نوعها لداخل والجدد postanatalnomu الفترة المبكرة من التنمية البشرية، ولكن أيضا في جميع أنحاء تطور الجنين - تكاثرية وتشكيل مستعمرة نشاط HSCs المشتقة من نخاع العظام أو الدم المحيطي من الكبار، ويتناسب عكسيا مع عمر المانحة.