الخلايا الجذعية المكونة للدم في كيس الصفار

ومن الواضح أن مختلف التكاثري وتمايز للدم قدرة الخلايا الجذعية نظرا لخصوصيات تنميتها التخلق، لأنه في عملية ontogenesis في تغيير الإنسان حتى توطين المناطق الرئيسية من الدم. تلتزم الخلايا السلية المكونة للدم من الكيس المحي في الجنين بتكوين خط خلوي للكريات الحمر بشكل حصري. بعد انتقال GSK الأساسي إلى الكبد والطحال في المكروية من هذه الأجهزة ، يتم توسيع نطاق خطوط التكليف. على وجه الخصوص ، الخلايا الجذعية المكونة للدم اكتساب القدرة على توليد الأنساب اللمفاوية. في فترة ما قبل الولادة ، تصل الخلايا الأولية المكونة للدم إلى منطقة التوطين النهائي وتستعمر النخاع العظمي. في عملية نمو الجنين في دم الجنين يحتوي على عدد كبير من الخلايا المكونة للدم الجذعية. على سبيل المثال ، في الأسبوع الثالث عشر من الحمل ، يصل مستوى HSC إلى 18٪ من إجمالي عدد خلايا الدم أحادية النواة. في المستقبل ، هناك انخفاض تدريجي في محتواها ، ولكن حتى قبل الولادة ، تختلف كمية HSC في دم الحبل السري قليلاً عن عددها في النخاع العظمي.

وفقا للأفكار الكلاسيكية، ويتم تغيير الطبيعي في توطين الدم أثناء التطور الجنيني من الثدييات بها الهجرة وتنفيذ المكروية الخلايا الجذعية المكونة للدم المحفزة الجديدة - من الكيس المحي في الكبد والطحال ونخاع العظام. منذ المراحل الأولى من التطور الجنيني من الأنسجة المكونة للدم يحتوي على عدد كبير من الخلايا الجذعية، مما يقلل كما الحمل، والأكثر واعدة للحصول على الخلايا الجذعية المكونة للدم يعتبر المكونة للدم أنسجة الكبد الجنين معزولة عن abortnogo المواد في-5-8 أسبوع من الحمل.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]

أصل الخلايا الجذعية المكونة للدم

حقيقة أن تكوين الجنين من كريات الدم الحمراء ينشأ في جزر الدم من الكيس المحي ، لا شك فيه. ومع ذلك ، فإن إمكانات التمايز في المختبر للخلايا المكونة للدم في الكيس الصفار محدودة للغاية (تختلف في المقام الأول في كريات الدم الحمراء). وتجدر الإشارة إلى أن زرع الخلايا الجذعية المكونة للدم من كيس الصفار ليست قادرة على استعادة تكون الدم بعد فترة طويلة. اتضح أن هذه الخلايا ليست سلائف GSK لكائن بالغ. GSK صحيح تظهر في وقت سابق، في 3-5 أسابيع من نمو الجنين، في منطقة تشكل نسيج المعدة وبطانة الأوعية الدموية (splanchnopleura paraaortic، P-SP)، وبدلا من الغدد التناسلية العناوين الشريان الأورطي والكلى الابتدائي - في الميدان أو حتى mesonephros يسمى AGM- المنطقة. ولقد ثبت أن الخلايا AGM-المنطقة ليست فقط مصدرا للشهادة الثانوية العامة، ولكن الخلايا البطانية للأوعية الدموية، والخلايا الآكلة، والعمليات التي ينطوي عليها تكوين العظام. في الأسبوع ال 6 من الحمل المبكر الخلايا الاصلية المكونة للدم من السفر AGM-حي إلى الكبد، الذي هو أهم أعضاء تكوين الدم للجنين قبل الولادة.

بما أن هذه اللحظة مهمة للغاية من وجهة نظر زرع الخلايا ، فإن مشكلة أصل HSC في عملية التطور الجنيني البشري تستحق عرضاً أكثر تفصيلاً. الفكرة الكلاسيكية أن الخلايا الجذعية المكونة للدم من الثدييات والطيور المستمدة من مصدر الملحقات الجلدية، بناء على أبحاث ميتكالف ومور، الذي استخدم لأول مرة تقنيات الاستنساخ GSK وأحفادهم، معزولة عن الكيس المحي. خدمت نتائج عملهم كأساس لنظرية الهجرة ، التي بموجبها GSK ، التي نشأت أولاً في الكيس المحي ، تملأ دائمًا الأعضاء المكونة للدم العابرة والنهائية لأنها تشكل المكروية المقابلة. هذه هي الطريقة التي ثبت من خلالها أن توليد GSK ، الذي تم توطينه في البداية في الكيس المحي ، هو بمثابة الأساس الخلوي لتكوين الدم الدقيق.

الخلايا الاصلية المكونة للدم من الكيس المحي هي من بين الأكثر أوائل الخلايا الاصلية المكونة للدم. يتم وصف النمط الظاهري الخاص بهم من خلال الصيغة AA4.1 + CD34 + c-kit +. على عكس HSCs تنضج نخاع العظام، وأنها لا تعبر عن مستضدات هيئة السلع التموينية-1 وMHC الجزيء. ويبدو أن ظهور المضادات علامة على الأغشية سطح GSK الكيس المحي من خلال زراعة يتوافق مع التفريق أثناء التطور الجنيني مع تشكيل خطوط ارتكبت من تكون الدم: يقلل من مستوى التعبير عن مستضد CD34 وخاصتك-1 يزيد من التعبير عن CD38 و CD45RA، تظهر جزيئات HLA-DR. في اللاحقة الناجمة عن السيتوكينات وعوامل النمو، في التعبير المختبر التخصص يبدأ مستضدات معينة للخلايا المكونة للدم السلف من خط خلية معينة. ومع ذلك، فإن نتائج الدراسة من الدم الجنيني في ممثلي ثلاث فئات من الفقاريات (البرمائيات والطيور والثدييات)، وعلى وجه الخصوص، وتحليل أصل HSCs هي المسؤولة عن تكون الدم نهائيا في ontogenesis ما بعد الولادة، خلافا للأفكار الكلاسيكية. وقد تبين أن ممثلي جميع الفئات المذكورة أعلاه في مرحلة التطور الجنيني تشكيل منطقتين المستقلة التي تعاني من GSK. مثلت خارج الجنين المنطقة "الكلاسيكية" الكيس المحي أو مشتقاته، في حين أن حددت مؤخرا intraembrionalnaya منطقة توطين HSC تضم اللحمة المتوسطة شبه الأبهري وAGM-المنطقة. ، فإنه يمكن القول اليوم أن البرمائيات والطيور HSCs نهائية المستمدة من مصادر intraembrionalnyh، في حين أنه في الثدييات والرجل GSK جزء من الكيس المحي في الدم النهائي لا يزال من المستحيل القضاء نهائيا.

الدم الجنينية في الكيس المحي هو أساسا الكريات الحمر الرئيسي، الذي يتميز الحفاظ على نواة في جميع مراحل نضوج كرات الدم الحمراء ونوع من التوليف الهيموغلوبين الجنيني. وفقا لأحدث البيانات ، تنتهي موجة الكريات الحمر الأولية في الكيس المحي في اليوم الثامن من التطور الجنيني. ويتبع ذلك فترة تراكم خلايا سلفي متقشرة erythroid - BFU-E ، والتي تتشكل بشكل حصري في كيس الصفار وتظهر لأول مرة في اليوم التاسع من الحمل. تشكل المرحلة التالية من التطور الجنيني بالفعل خلايا سلفي متقلبة erythroid - CFU-E ، وكذلك الخلايا الجذعية (!) و CFU-GM. لأنه يقوم على وجود وجهة النظر هذه أن الخلايا الاولية نهائية تنشأ في الكيس المحي، الهجرة من خلال مجرى الدم، تتراكم في الكبد وبسرعة الشروع في المرحلة الأولى intraembrionalnogo الدم. وفقا لهذه التأكيدات، الكيس المحي يمكن النظر فيها، من جهة، ومكان الكريات الحمر الرئيسي، والآخر - كمصدر أول من الخلايا المكونة للدم السلائف نهائية في التطور الجنيني.

وتبين أن الخلايا المكونة للمستعمرة مع إمكانية التكاثري عالية قد تكون معزولة من الكيس المحي هو بالفعل في اليوم 8TH من الحمل، أي قبل وقت طويل من إغلاق الأوعية الدموية للجنين والكيس المحي. والخلايا من كيس الصفار ذات القدرة التكاثرية العالية في المستعمرات ذات الشكل المختبر الذي لا يختلف حجمه وتكوينه الخلوي عن البارامترات المقابلة لنمو استزراع الخلايا الجذعية لنخاع العظم. وفي الوقت نفسه، مع مستعمرة retransplantation خلايا الكيس المحي مع إمكانية التكاثري عالية شكلت أكثر بكثير مستعمرة تشكيل الخلايا والخلايا الوليدة متعددة القدرات السلف من نخاع العظم مع الخلايا الاصلية المكونة للدم.

الاستنتاج النهائي حول دور الخلايا الجذعية المكونة للدم في الكيس المحي تكون الدم نهائيا يمكن أن تعطي نتائج التي المؤلفين حصلت على خط من الخلايا البطانية من الكيس المحي (G166)، التي دعمت بشكل فعال له تكاثر الخلايا مع المظهرية والوظيفية خصائص HSC (AA4.1 + WGA +، منخفضة الكثافة وخصائص لاصقة ضعيفة). زاد محتوى هذا الأخير خلال الزراعة على طبقة المغذي للخلايا C166 بأكثر من 100 مرة خلال 8 أيام. المستعمرات مختلطة نمت على underlayer من خط الخلية S166، تم تحديد الضامة، المحببة، السوية العرطلة، وحيدات، وخلايا الانفجار، وخلايا السلائف من B والخلايا الليمفاوية T. صفار خلايا كيس، وتزايد على طبقة فرعية من الخلايا البطانية تمتلك القدرة على الإنجاب في حد ذاته والذي عقد في تجارب الكتاب إلى ثلاثة مقاطع. التعافي من خلالها الدم في الفئران البالغين الذين يعانون من نقص المناعة مجتمعة (SCID) يرافقه تشكيل كل أنواع الكريات البيض، وكذلك T و B الخلايا الليمفاوية. ومع ذلك، فإن الكتاب في أبحاثهم باستخدام خلايا من الكيس المحي من جنين لمدة 10 أيام، والتي أغلقت الأوعية الدموية من خارج وintraembrionalnye بالفعل، وهذا لا يستبعد وجود بين خلايا الكيس المحي GSK intraembrionalnogo المنشأ.

وفي الوقت نفسه، كشف تحليل إمكانيات تمايز الخلايا المكونة للدم من المراحل الأولى من التنمية، وذلك قبل الجمع بين النظام المختار الأوعية الدموية للجنين والكيس المحي (8-8.5 أيام الحمل) وجود السلائف من خلايا T و B في الكيس المحي، ولكن ليس في جسم الجنين . وتختلف طريقة في المختبر من نظام زراعة من خطوتين على أحادي الطبقة من الخلايا الظهارية وتحت الظهارة من الخلايا وحيدة النواة الغدة الصعترية في الكيس المحي من قبل T و T-تنضج الخلايا الليمفاوية. وفقا للشروط الثقافة نفسها، ولكن على أحادي الطبقة من الخلايا اللحمية في الكبد ونخاع العظم خلايا وحيدة النواة من الكيس المحي ومتباينة في الخلايا ما قبل-B وناضجة IglVT-B-الخلايا الليمفاوية.

وتشير نتائج هذه الدراسات إمكانية تطوير خلايا الجهاز المناعي من خارج الجنين الأنسجة الكيس المحي، وتشكيل T الابتدائية وخطوط الخلايا B يعتمد على العوامل المكونة للدم انسجة المكروية الأجهزة الجنينية.

وأشار مؤلفين آخرين أيضا أن الخلايا الكيس المحي مع الفعليات تضم تمايز اللمفاوية، والخلايا الليمفاوية شكلت لا تختلف عن تلك الخصائص مولدة في الحيوانات البالغة. تبين أن خلايا الكيس المحي من الجنين 8-9 يوما يمكن استعادة اللمفاويات الغدة الصعترية في atimotsitarnom مع ظهور ناضجة CD3 + CD4 + - وCD8 + SDZ + الخلايا الليمفاوية حيازة ذخيرة زينت مستقبلات الخلايا التائية. وبالتالي، قد يتم ملؤها الغدة الصعترية بواسطة خلايا المنشأ الملحقات الجلدية، ولكن من المستحيل أن تستبعد إمكانية الهجرة إلى الخلايا الاولية الصعترية بواسطة الخلايا الليمفاوية T من مصادر اللمفاويات intraembrionalnyh.

إعادة تعمير المناطق المنكوبة فترة طويلة ومع ذلك، زرع الخلايا المكونة للدم الكيس المحي إلى المستفيدين الكبار المشع لم يكتمل دائما للدم توطين الأنسجة، وهو في المختبر من خلايا الكيس المحي شكل مستعمرات الطحال أصغر بكثير من الخلايا AGM-المنطقة. في بعض الحالات، عن طريق الخلايا الكيس المحي 9 أيام الجنين لا يزال من الممكن تحقيق طويل الأمد (تصل إلى 6 أشهر) إعادة تعمير المستلمين الأنسجة المكونة للدم المشع. ويعتقد الباحثون أن خلايا الكيس المحي النمط الظاهري CD34 + ج طقم + من خلال قدرتها على إعادة الناس الى أعضاء تكوين الدم المدمرة، ليس فقط لا تختلف عن تلك التي AGM-المنطقة، ولكن أيضا استعادة أكثر فعالية الدم، كما هو الحال في الكيس المحي أنها تحتوي على ما يقرب من 37 مرات أكثر .

وتجدر الإشارة إلى أنه في التجارب، والخلايا المكونة للدم من الكيس المحي مع مستضدات علامة GSK (ج طقم + و / أو CD34 + وCD38 +)، والتي أدخلت مباشرة إلى الكبد أو ذرية الوريد البطن من إناث الفئران تلقي حقن بوسلفان إلى يوم ال18 من الحمل. في هذه الحيوانات حديثة الولادة تكون النقويات الخاصة كانت المنخفضة بصورة حادة بسبب القضاء على الخلايا الجذعية المكونة للدم التي تسببها بوسلفان. بعد الزرع، حدد HSCs من الكيس المحي لشهور وفي الدم المحيطي من المتلقين كريات تحتوي على علامة المانحة - glitserofasfatdegidrogenazu. تبين أن الكيس المحي من GSK خفض محتوى الخلايا اللمفاوية، النخاعي والأنساب محمر الدم والغدة الصعترية والطحال ونخاع العظام، حيث كان مستوى الخيمرية العالي في حالة داخل الكبد، وليس خلايا الكيس المحي في الوريد. ويقترح المؤلفان أن HSCs من الكيس المحي الأجنة المراحل الأولى من التنمية (تصل إلى 10 يوما) لتسوية ناجحة الأجهزة المكونة للدم من المستفيدين الكبار في حاجة لتعاون مبدئي مع المكروية للدم من الكبد. ومن الممكن أن يكون في مرحلة التطور الجنيني هناك مرحلة فريدة من التنمية، عندما خلايا الكيس المحي، المهاجرة في المقام الأول في الكبد، ومن ثم تكتسب القدرة على استعمار سدى تشكيل أجهزة المستفيدين الكبار.

وفي هذا الصدد تجدر الإشارة إلى أن الخيمرية من خلايا الجهاز المناعي في كثير من الأحيان لوحظ بعد زرع خلايا نخاع العظم إلى المتلقين المشع ناضجة جنسيا - في خلايا الدم المتبرع الظواهر الماضية بكميات كبيرة بما يكفي وجدت بين B- والخلايا اللمفاوية التائية والمحببة المتلقي الذي يستمر على الأقل 6 أشهر

طرق المورفولوجية الخلايا المكونة للدم في الثدييات اكتشفت لأول مرة في اليوم 7TH من التطور الجنيني وتقدم الجزر المكونة للدم داخل الأوعية من الكيس المحي. ومع ذلك، فإن التمايز للدم الطبيعي في الكيس المحي يقتصر الكريات الحمراء الابتدائية الحفاظ الأساسية وتوليف الهيموغلوبين الجنيني. ومع ذلك، تقليديا كان يعتقد أن الكيس المحي هو المصدر الوحيد للHSC الهجرة إلى أعضاء تكوين الدم من الجنين وتوفير الدم نهائيا في الحيوانات البالغة، منذ ظهور HSC في جسم الجنين هو إغلاق الأوعية الدموية للجنين والكيس المحي. لدعم وجهة النظر هذه، وفقا لبيانات في المختبر في استنساخ خلايا من الكيس المحي تؤدي إلى المحببة والضامة، وهو في فيفو - مستعمرات الطحال. ثم خلال تجارب زرع تبين أن الخلايا المكونة للدم من الكيس المحي، والتي، في الكيس المحي قادرة على تمييز فقط في خلايا الدم الحمراء الأولية في المكروية الكبد من حديثي الولادة وتعليم الكبار SCID الفئران دمر الغدة الصعترية أو اللحمية المغذية اكتساب القدرة على إعادة ملء الأجهزة المكونة للدم مع استعادة جميع خطوط من انتظام ضربات الدم حتى في الحيوانات المتلقية للبالغين. من حيث المبدأ، وهذا يمكن أن يعزى لهم فئة GSK صحيح - مثل عمل الخلايا وفي فترة ما بعد الولادة. ومن المفترض أن الكيس المحي، جنبا إلى جنب مع المنطقة إجتماع الجمعية العامة العادية، ومصدرا للHSCs لتكون الدم نهائيا في الثدييات، ومع ذلك، لا يزال من غير الواضح من مساهمتها في تطوير نظام المكونة للدم. أنا لا أفهم معنى البيولوجي والوجود في مرحلة التطور الجنيني المبكر من الثدييات، واثنين من أعضاء تكوين الدم مع وظائف مماثلة.

يستمر البحث عن إجابات لهذه الأسئلة. في الجسم الحي فشل في إثبات وجود الكيس المحي الأجنة 8-8،5 يوما اللمفاويات خلية في الحد من المشع sublethally SCID الفئران يعانون من نقص حاد في T و B الخلايا الليمفاوية. تم حقن الخلايا المكونة للدم من كيس الصفار على حد سواء intraperitoneally ومباشرة في نسيج الطحال والكبد. بعد 16 أسبوعا، تحديد المستفيدين TCR / CD34 \ CD4 + CD8 + T والخلايا اللمفية وB-220 خلية + الغلوبولين المناعي + B المسمى antrhgenami المانحة MHC. في الجسم ، 8-8.5 أيام أجنة الخلايا الجذعية ، قادرة على استعادة مثل هذا الجهاز المناعي ، لم يجد المؤلفون.

تمتلك الخلايا المكونة للدم في كيس الصفار قدرة عالية على التكاثر وتكون قادرة على التكاثر الذاتي لفترات طويلة في المختبر. بعض الكتاب وقد حددت هذه الخلايا كأساس لشهادة الثانوية العامة على المدى الطويل (حوالي 7 أشهر) توليد خلايا محمر السلف متميزة من الأسلاف نخاع العظام من خط محمر الركض مدة أطول، مستعمرات كبيرة الحجم، وزيادة الحساسية للعوامل النمو والانتشار أكثر لفترة طويلة. بالإضافة إلى ذلك ، في ظل الظروف المناسبة لزراعة الخلايا من الكيس المحي في المختبر ، يتم تشكيل الخلايا السلوية اللمفاوية أيضا.

وتشير هذه البيانات مصدرا العام للالكيس المحي GSK، حيث أقل من التزمت وبالتالي إمكانات التكاثري كبيرة من الخلايا الجذعية نخاع العظام. ومع ذلك، على الرغم من أن الكيس المحي يحتوي على الخلايا الاصلية المكونة للدم المحفزة، على المدى الطويل دعم مختلف خطوط التمايز للدم في المختبر، والمعيار الوحيد للفائدة GCW هو قدرتها على إعادة ملء أجهزة المكونة للدم طويلة من المتلقي، والخلايا المكونة للدم والتي تعاني من نقص أو تلف وراثيا. وهكذا، فإن السؤال الرئيسي هو ما إذا كانت الخلايا المكونة للدم المحفزة من الكيس المحي تهاجر واستعمار الأجهزة المكونة للدم وtselesoorbrazno تنقح العمل الشهير، والتي أثبتت قدرتها على إعادة الناس الى أعضاء تكوين الدم من الحيوانات الناضجة جنسيا مع تشكيل خطوط المكونة للدم الرئيسية. في أجنة الطيور في 70 المنشأ تم تحديد intraembrionalnye مصادر نهائية HSC التي كانت تسمى سابقا إلى التشكيك في الأفكار التي أنشئت حول أصل أدنإكسل] GSK، بما في ذلك ممثلين عن فئات أخرى من الفقاريات. في السنوات القليلة الماضية كانت هناك منشورات عن وجود الثدييات والبشر مواقع intraembrionalnyh مماثلة تحتوي على GSK.

ومرة أخرى نلاحظ أن المعرفة الأساسية في هذا المجال مهم للغاية لزرع الخلايا العملي، لا يساعد فقط تحديد المصدر المفضل للشهادة الثانوية العامة، ولكن أيضا لتحديد خصائص التفاعل بين الخلايا المكونة للدم الابتدائية من الكائنات الغريبة وراثيا. ومن المعروف أن حقن الخلايا الجذعية المكونة للدم الإنسان في الجنين الأغنام الكبد توالد الجنين في مرحلة تؤدي إلى إنتاج حيوانات خيالية والدم ونخاع العظام عازمون ثابت 3-5٪ من الخلايا المكونة للدم الإنسان. في الوقت نفسه ، لا يغير نظام GCS البشري النمط النووي ، ويحافظ على معدل مرتفع من الانتشار والقدرة على التفريق. وبالإضافة إلى ذلك، هل HSC xenogeneic المزروعة لا تتعارض مع نظام المناعة والخلايا البلعمية للكائن المضيف ولا تتحول إلى الخلايا السرطانية التي شكلت أساس التنمية المكثفة من الطرق لتصحيح داخل الرحم من الأمراض الوراثية وراثية باستخدام المجالس الاقتصادية والاجتماعية أو HSCs transfected جينات ناقصة.

ولكن في أي مرحلة من مراحل التطور الجنيني يكون من الأنسب إجراء مثل هذا التصحيح؟ تظهر الخلايا لأول مرة، والعزم على تكون الدم في الثدييات مباشرة بعد الزرع (يوم 6 من الحمل)، عندما الخصائص المورفولوجية للتمايز للدم والأعضاء المكونة للدم افتراضية ليست متاحة بعد. في هذه المرحلة، يمكن للخلايا فأر الجنين المتفرقة إعادة النشرات الأجهزة المكونة للدم المستفيدين المشع لتشكيل كريات الدم الحمراء والخلايا الليمفاوية، مختلفة من الخلايا المضيفة أو الهيموغلوبين اكتب على التوالي glitserofosfatizomerazy وعلامة الكروموسومات إضافية (السل) من الخلايا المانحة. في الثدييات، مثل الطيور، جنبا إلى جنب مع كيس الصفار إلى إغلاق مجموع السرير الوعائي مباشرة في جسد الجنين في splanhnoplevre شبه الأبهري تظهر الخلايا المكونة للدم. من تخصيص AGM-منطقة الخلايا المكونة للدم AA4.1 + النمط الظاهري ويدعى الخلايا المكونة للدم متعددة القدرات تشكيل T- وB-الخلايا الليمفاوية، المحببة، السوية العرطلة، والضامة. ظاهريا، وهذه الخلايا متعددة القدرات السلف قريبة جدا من HSCs نخاع العظام في الحيوانات البالغة (CD34 + ج طقم +). عدد AA4.1 متعدد القدرات + خلايا بين كل منطقة خلية إجتماع الجمعية العامة العادية هو صغير - فهي ليست أكثر من 1/12 جزء منه.

في الجنين البشري ، تم العثور أيضا على منطقة AGM-homologous من الحيوانات ، وهي منطقة داخل التاجي تحتوي على HSC. علاوة على ذلك ، في البشر أكثر من 80٪ من الخلايا متعددة القدرات ذات القدرة التكاثرية العالية توجد في جسم الجنين ، على الرغم من وجود هذه الخلايا في الكيس المحي. أظهر تحليل مفصل لتعريبها أن المئات من هذه الخلايا يتم تجميعها في مجموعات مدمجة تقع بالقرب من البطانة الداخلية للجدار البطني للشريان الأبهر الظهري. Phenotypically ، فهي خلايا CD34CD45 + لين. على العكس ، في الكيس المحي ، وكذلك في الأعضاء الأخرى المكونة للدم من الجنين (الكبد ، نخاع العظم) ، هذه الخلايا هي واحدة.

ونتيجة لذلك، تحتوي الجنينية البشرية-المنطقة إجتماع الجمعية العامة العادية مجموعات من الخلايا المكونة للدم التي ترتبط بشكل وثيق مع بطني البطانة ظهري الشريان الأورطي. هذا الاتصال يمكن تتبع ومستوى immunochemical - ومجموعات من الخلايا المكونة للدم والخلايا البطانية معربا عن عامل النمو البطاني الوعائي، FLT-3 يجند ومستقبلاتها FLK-1 و STK-1، فضلا عن عامل النسخ خلايا سرطان الدم الجذعية. المشتقات الوسيطة في منطقة إجتماع الجمعية العامة العادية تمثل tyazhem تقريب خلايا كثيفة تقع على طول الشريان الأبهر الظهري والتعبير عن tenascin C - بروتين سكري المادة الأساسية تشارك بنشاط في عمليات التفاعلات خلية خلية والهجرة.

الخلايا الجذعية متعددة القدرات AGM-حي بعد زرع استعادة بسرعة الدم في فئران بالغة ويتعرض لفترة طويلة (تصل إلى 8 أشهر) توفير الدم فعالة. في الكيس المحي للخلايا ذات الخصائص ، لم يكشف المؤلفون. وأكدت نتائج هذه الدراسة من قبل غيرها من الأعمال التي أظهرت أن المراحل الأولى من تطور الأجنة (10.5 يوم) المنطقة AGM هي المصدر الوحيد للخلايا التي ينطبق عليها تعريف GCW، النخاعي واللمفاوية استعادة الدم في البالغين المشع المتلقين.

من تخصيص AGM-منطقة خط انسجة AGM-S3، والتي تدعم توليد الخلايا في الثقافة CFU-GM الأسلاف التي ارتكبت، الاتحاد البلغاري-E، كفو كفو-E والنوع المختلط. يزداد محتوى هذا الأخير أثناء الزراعة على الطبقة الفرعية المغذية لخلايا AGM-S3 من 10 إلى 80 مرة. لذلك، في المكروية من خلايا انسجة الحالية AGM-المنطقة، ودعم كفاءة الدم، لذلك فهو AGM-المنطقة قد تكون أيضا أعضاء تكوين الدم الجنيني - المصدر النهائي للشهادة الثانوية العامة، وهذا هو، GSK تشكيل الأنسجة المكونة للدم من حيوان بالغ.

أظهرت تقدما immunofenotipirovanie تكوين الخلايا AGM-المنطقة أنه يقيم ليس فقط الخلايا المكونة للدم متعددة القدرات، ولكن أيضا خلايا ملتزمة التمايز النخاعي واللمفاوية (T والخلايا الليمفاوية B). ومع ذلك، عند التحليل الجزيئي للCD34 الفردية + ج طقم + الخلايا من AGM-المنطقة باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل كشفت تفعيل فقط بيتا الغلوبين والميلوبيروكسيديز ولكن ليس الجينات اللمفاوية ترميز تركيب CD34، خاصتك-1 و 15. تفعيل النسب جينات معينة جزئية نموذجية ل المراحل المبكرة للجين من توليد HSC والخلايا السلفية. وبالنظر إلى أن عدد kommiti- الأسلاف روان في AGM-مساحتها 10 يوم الجنين بنسبة 2-3 أوامر من حجم أقل مما كانت عليه في الكبد، ويمكن القول أنه في يوم 10 من الدم الجنيني في اجتماع الجمعية العامة العادية هو مجرد بداية، في حين أساسا يتم بالفعل نشر خطوط المكونة للدم خلال هذه الفترة.

في الواقع، على عكس السابقة (9-11 أيام) من الخلايا المكونة للدم تنبع من الكيس المحي ومنطقة AGM، التي إعادة إسكانها المكروية للدم من الأطفال حديثي الولادة، ولكن ليس الكبار، والخلايا المكونة للدم السلف لا يتطلب 12-17 يوما كبد الجنين في وقت مبكر بعد الولادة المكروية والمكونة للدم أجهزة تحتل حيوان بالغ ليست أسوأ من الأطفال حديثي الولادة. وكانت HSCs بعد زرع الجنين الدم الكبار الكبد في الفئران المتلقي المشع بولكلونل في الطبيعة. وبالإضافة إلى ذلك، وذلك باستخدام المستعمرات المسمى يظهر أن عملية استنساخ أنشئت كانت الخلافة نسيلي يطيع تماما، اكتشفت في نخاع العظام الكبار. ولذلك، GSK علامة كبد الجنين الشروط لطيف كثيرا دون السيتوكينات الخارجية prestimulyatsii، لديها بالفعل سمات الأساسية من الكبار HSCs لا حاجة في أوائل المكروية بعد الجنينية، في حالة من الراحة العميقة بعد الزرع وحشد بالتتابع klonoobrazovanie وفقا لخلافة نسيلي نموذج.

من الواضح أننا يجب أن نتناول تفاصيل أكثر عن ظاهرة الخلافة النونية. يحمل إرثروبويسيس Erythropoiesis الخلايا المكونة للدم المكونة للدم والتي لها قدرة عالية على التكاثر والقدرة على التفريق في جميع سلالات خلايا الدم البادية الملتزمة. مع تكون الدم الطبيعي ، تبقى معظم الخلايا الجذعية المكونة للدم في حالة الأمراض الجلدية ويتم تحريكها من أجل الانتشار والتمايز ، وتشكل على التوالي مستنسخات متعاقبة. هذه العملية تسمى الخلافة النونية. تم الحصول على أدلة تجريبية من الخلافة النسيلة في نظام المكونة للدم في دراسات مع GSK ملحوظ مع نقل الجينات الفيروسية. في الحيوانات البالغة ، تتم المحافظة على تكون الدم من قبل العديد من الحيوانات المنتجة للدم في وقت واحد تعمل مستمدة من GSK. واستنادا إلى ظاهرة الخلافة النونية ، تم تطوير نهج إعادة تعمير لتحديد GCS. ووفقا لهذا المبدأ، تمييز على المدى الطويل HSCs (على المدى الطويل الخلايا الجذعية المنتجة للدم، LT-HSC)، تكون قادرة على استعادة النظام للدم التعلم مدى الحياة، وشهادة الثانوية العامة على المدى القصير، لأداء هذه الوظيفة لفترة محدودة من الزمن.

وإذا نظرنا إلى الخلايا الجذعية المكونة للدم من حيث النهج repopulyatsionnogo، سمة من خلايا الكبد الجنين للدم هي قدرتها على خلق مستعمرة، وهو أعلى بكثير من تلك التي مع زيادة في GSK دم الحبل السري أو نخاع العظم في حجمها، وهذا ينطبق على جميع أنواع المستعمرات. هذه الحقيقة تشير بالفعل إلى إمكانات التكاثر العالي للخلايا المكونة للدم في الكبد الجنيني. ومن المزايا الفريدة لالخلايا الاصلية المكونة للدم الجنين الكبد - أقصر بالمقارنة مع المصادر الأخرى للدورة الخلية، وهو أمر مهم من وجهة نظر إعادة تعمير كفاءة الدم في الزرع. تحليل تكوين الخلايا المكونة للدم من تعليق تم الحصول عليها من مصادر كائن ناضج، وتبين أن في جميع مراحل تطور الجنين من خلايا الأنوية ممثلة مفيد خلايا متباينة عضال، وعدد والنمط الظاهري من التي تعتمد على عمر المتبرع الأنسجة التخلق المنتجة للدم. على وجه الخصوص، تعليق نخاع العظام والوحيدات وخلايا دم الحبل السري أكثر من 50٪ يتكون من خلايا اللمفاوية النسب ناضجة، في حين أن أقل من 10٪ من الخلايا الليمفاوية الموجودة في الجنين الأنسجة مكون الدم الكبد. وعلاوة على ذلك، فإن الخلايا خط الدم النخاعي في كبد الجنين ومحمر الجنين قدمت مفيد المقبل، بينما في دم الحبل السري ونخاع العظام محببة-بلعم تسود العناصر.

المهم هو حقيقة أن الكبد الجنيني يحتوي على مجموعة كاملة من أوائل سببات تكون الدم. وتشمل هذه الأخيرة خلايا كريات الدم الحمراء والخلايا الحبيبية والخلايا المولدة للدم والمكونة من عدة مستعمرات. من الأسلاف أكثر بدائية - LTC-IC - قادرة على التكاثر والتفريق في المختبر لمدة 5 أسابيع أو أكثر، وأيضا للحفاظ على النشاط الوظيفي بعد engraftment في جسم المتلقي في خيفي، وحتى زرع xenogeneic في الحيوانات العوز المناعي.

غلبة الجدوى البيولوجية في خلايا الكبد محمر الجنين (ما يصل إلى 90٪ من مجموع الخلايا المكونة للدم) وذلك بسبب الحاجة لتوفير كتلة كرات الدم الحمراء وزيادة حجم الدم بسرعة من وضع الجنين. في الكريات الحمر كبد الجنين تمثل السلائف محمر النووية درجات مختلفة من النضج التي تحتوي على الهيموغلوبين الجنيني (a2u7)، والذي يرجع إلى أعلى النسب للأوكسجين يضمن امتصاص الفعال لهذا الأخير من دم الأم. ويرتبط تكثيف الكريات الحمر في كبد الجنين مع زيادة المحلية في تركيب الإريثروبويتين (EPO). ومن الجدير بالذكر أن تنفيذ الإمكانات للدم من خلايا الكبد الجنين للدم بما فيه الكفاية وجود حدها الإريثروبويتين، في حين التزام النسب إلى HSCs نخاع الكريات الحمر العظام ودم الحبل السري يتطلب مزيجا من السيتوكينات وعوامل النمو التي تتكون من EPO، SCF، GM-CSF وIL-3. في هذه أوائل الخلايا الاصلية المكونة للدم معزولة من كبد الجنين دون مستقبلات EPO، لا تستجيب للإرثروبويتين الخارجية. لتحريض الكريات الحمر في تعليق الخلايا وحيدة النواة الكبد الجنين يتطلب وجود المزيد من الخلايا eritropoetinchuvstvitelnyh متقدمة مع النمط الظاهري CD34 + CD38 +، التي تعبر عن مستقبلات EPO.

في الأدبيات لا يوجد حتى الآن توافق في الآراء حول تشكيل تكون الدم في الفترة الجنينية. لم يتم تأسيس أهمية وظيفية من وجود مصادر خارج وداخل الجنين من الخلايا السليفة المكونة للدم. ولكن ليس هناك شك في أنه في مرحلة التطور الجنيني كبد الإنسان هو الجهاز المركزي للالدم ولمدة 6-12 أسبوعا من الحمل هو المصدر الرئيسي للخلايا الجذعية المكونة للدم التي تعيش في الطحال والغدة الصعترية ونخاع العظام، GDR تحقيق المهام ذات الصلة في فترات ما قبل وبعد الولادة التنمية.

وتجدر الإشارة مرة أخرى إلى أن الكبد الجنيني بالمقارنة مع مصادر أخرى يتميز بأعلى محتوى من HSC. ما يقرب من 30 ٪ من خلايا CD344 من الكبد الجنيني لديها النمط الظاهري من CD38. في الوقت نفسه ، لا يتجاوز عدد الخلايا السلوية اللمفاوية (CD45 +) في المراحل المبكرة من تكون الدم في الكبد أكثر من 4٪. تبين أنه، بما أن الجنين 7-17 أسبوعا من الحمل، وعدد من B الليمفاوية يزيد تدريجيا مع "خطوة" الشهرية 1.1٪، في حين أن مستوى GSK خفضت بشكل دائم.

يعتمد النشاط الوظيفي للخلايا الجذعية المكونة للدم أيضًا على فترة التطور الجنيني لمصدرها. 6-8 دقائق و9-12 دقائق أسبوعا من الحمل عند المثقف في المتوسط نصف صلب في وجود SCF، GM-CSF، IL-3، IL-6 و EPO أظهر التحقيق في مستعمرة خلايا الكبد تشكيل النشاط الأجنة البشرية أن العدد الكلي للمستعمرات في 1 ، 5 مرات أعلى عند زرع الكبد الجنينية HSV في وقت مبكر في التنمية. وفي الوقت نفسه، فإن عدد الخلايا الكبدية السلف تكون النقويات كما CFU-GEMM، في 6-8 أسابيع من التطور الجنيني أكثر من ثلاثة أضعاف العدد في 9-12 أسبوعا من الحمل. بشكل عام ، كان نشاط تشكيل الخلايا الكبدية المكونة للدم من الأجنة في الأشهر الثلاثة الأولى من الحمل أعلى بكثير من الثلث الثاني من خلايا الكبد الجنينية.

وتشير البيانات المذكورة أعلاه أن كبد الجنين في مرحلة التطور الجنيني المبكر يتميز ليس فقط على نسبة عالية من أوائل الخلايا الاصلية المكونة للدم، ولكن تتميز الخلايا المكونة للدم من خلال مجموعة واسعة من التمايز في خطوط الخلايا المختلفة. وقد يكون لهذه الخصائص من النشاط الوظيفي من الخلايا الجذعية المكونة للدم الجنين الكبد بعض الأهمية السريرية، حيث خصائصها النوعية تسمح المتوقع تأثير علاجي عندما أعرب زرع حتى كمية صغيرة من الخلايا التي تم الحصول عليها في المراحل المبكرة من الحمل.

ومع ذلك ، فإن مشكلة عدد الخلايا الجذعية المكونة للدم المطلوبة للزرع الفعال تبقى مفتوحة وذات صلة. يتم بذل محاولات لحلها باستخدام إمكانات عالية من الاستنساخ الذاتي للخلايا المكونة للدم من الكبد الجنيني في المختبر مع تحفيزهم من قبل السيتوكينات وعوامل النمو. مع نضح ثابت في مفاعل حيوي من GSC المبكر من الكبد الجنيني ، بعد 2-3 أيام في الإخراج فمن الممكن الحصول على عدد الخلايا المكونة للدم الجذعية 15 مرة أعلى من مستوى خط الأساس. للمقارنة ، تجدر الإشارة إلى أنه لتحقيق زيادة 20 ضعفا في محصول دم الحبل السري HSC في نفس الظروف ، يستغرق الأمر أسبوعين على الأقل.

وهكذا ، يختلف الكبد الجنيني عن مصادر أخرى للخلايا الجذعية المكونة للدم مع محتوى أعلى من كل من الخلايا السلالية المكونة للدم في وقت مبكر. في الثقافة مع خلايا الكبد الجنين مع عوامل النمو مع النمط الظاهري CD34 + CD45Ra1 CD71l0W شكل 30 مرات أكثر المستعمرات من خلايا دم الحبل السري مماثلة، و 90 مرات أكثر من نخاع العظام HSCs. الأكثر وضوحا في هذه المصادر من الاختلاف في المحتوى في وقت مبكر من الخلايا الاصلية المكونة للدم تشكيل مستعمرات مختلطة - عدد CFU-GEMM في كبد الجنين يفوق في دم الحبل السري ونخاع العظام على التوالي 60 و 250 مرة.

أهمية هو حقيقة أن حتى الأسبوع ال18 من التطور الجنيني (خلال بداية الدم في نخاع العظام) في تنفيذ وظيفة مكون الدم ينطوي على أكثر من 60٪ من خلايا الكبد. منذ ما قبل الأسبوع ال13 من نمو الجنين في الإنسان هي الغدة الصعترية غائبة وthymocytes على التوالي، وزرع خلايا الكبد الجنين للدم من 6-12 أسبوعا من الحمل يقلل بشكل ملحوظ من مخاطر رد الفعل "الكسب غير المشروع مقابل المضيف" ولا يتطلب اختيار متبرع متوافق نسيجيا، كما أنه يسمح سهلة نسبيا لتحقيق خيبة الدم.