PCR كوسيلة لتشخيص الأمراض الوراثية

PCR هو إنجاز جديد في علم الوراثة الجزيئي ، يستخدم لتضخيم الحمض النووي ويسمح للجزء المعين من الحمض النووي (أي ، أي جينات ذات أهمية) بالتكرار السريع في المختبر أكثر من 200،000 مرة. لتنفيذ التفاعل ، يكفي أن تكون مادة DNA من خلية واحدة ؛ كمية الحمض النووي التي تضخمت بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) كبيرة لدرجة أن هذا الدنا يمكن ببساطة تلوينه (باستخدام المجسات المشعة بعد الرحلان الكهربي غير مطلوب). من المتطلبات الأساسية لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) معرفة تسلسل النوكليوتيدات في منطقة الحمض النووي المتضخم من أجل الاختيار الصحيح للبرايمرات المصنعة اصطناعيا.

حاليا، PCR هو العملية التي تحدث في أنبوب واحد وتتكون من الدورات المتكررة من التضخيم (نسخة، نسخة) من تسلسل الحمض النووي محددة من أجل الحصول على عدد كبير بما فيه الكفاية من النسخ التي يمكن تحديدها من قبل الكهربائي. أحد المكونات الرئيسية للتفاعل هو "البادئات" - oligonucleotides الاصطناعية المكونة من 20-30 قاعدة ، مكملة "للمواقع" (أقسام) من التلدين (التعلق) على الموقع المحدد لنموذج الحمض النووي.

PCR يتتابع تلقائيا في ترموستات للبرمجة - thermocycler (thermocycler). يتم تكرار دورة الخطوات الثلاث ، التي يتم الحصول على نسخ طبق الأصل من الجزء القابل للتحديد من القالب DNA ، 30-50 مرة وفقا لبرنامج مسبق من thermocycler. في الدورة الأولى ، تهجين oligopramers مع نموذج الحمض النووي الأصلي ، ثم (في دورات لاحقة) وجزيئات الحمض النووي توليفها حديثا لأنها تتراكم في خليط التفاعل. وفي الحالة الأخيرة، لا ينتهي تركيب DNA بسبب التغيرات في درجات الحرارة، وعند الوصول إلى منطقة الحدود DNA بوليميريز تضخيمها، والذي يحدد حجم المنطقة DNA تصنيعه حديثا إلى داخل النوكليوتيدات واحد.

كطريقة للكشف عن جزيئات الحمض النووي التي تم الحصول عليها ، يتم استخدام الكهربي ، عن طريق التي يتم تقسيم المواد تضخيمها وفقا لحجم amplicons (منتجات التضخيم).

بمساعدة PCR ، من الممكن إجراء تحقيقات مباشرة في مواقع توطين التحولات المشتبه بها أو مواقع متعددة الأشكال ، وكذلك لدراسة وجود أي خصائص محددة أخرى للحمض النووي.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]