فيتامين (أ) في الدم

القيم المرجعية (القاعدة) لتركيز فيتامين أ (الريتينول) في مصل الدم: في الأطفال 1-6 سنوات - 0.7-1.5 ميكرومتر / لتر ، 7-12 سنة - 0.91-1.71 أومول / لتر ، 13 -19 سنة - 0،91-2،51 μmol / l؛ في البالغين هو 1.05-2.09 μmol / لتر.

فيتامين (أ) يتعلق ذواب في الشحوم وموجود في شكلين - فيتامين A أو الريتينول (لا توجد إلا في المنتجات الحيوانية) وطليعة الفيتامين A، المعروفة باسم كاروتين الفعلي (المعد من الحيوان أو الأصل النباتي)، والتي يمكن تحويلها إلى الريتينول في الجدران الجهاز الهضمي. تقريبا يمتص 50-90٪ من فيتامين الغذاء واردة في الأمعاء الدقيقة ونقلها في كيلومكرونات المرتبطة المجمع إلى الكبد، حيث يتم تخزينها في شكل بالميتات الريتينول. إذا لزم الأمر ، يتم إطلاقه في مجرى الدم في شكل الريتينول ، والذي هو في تركيبة مع بروتين ربط فيتامين أ. في المصل ، يرتبط البروتين المرتبط بفيتامين أ + مركب الريتينول مع ترانستيريتين. من المصل ، يتم التقاط الريتينول من قبل الخلايا المستهدفة ، مثل مستقبلات الشبكية والظهارة.

عندما يدخل فيتامين (أ) الجسم إلى أكثر من المطلوب (180-430 ميكروغرام من الريتينول في اليوم اعتمادا على العمر والجنس والحالة الفسيولوجية) ، يترسب فائض في الكبد الذي يشكل مستودع هذا الفيتامين. مع انخفاض كمية الريتينول من الطعام ، يتم إطلاق مخازن الكبد في مجرى الدم ، والحفاظ على تركيز الريتينول في المصل عند المستوى الطبيعي (فوق 0.7 ميكرومول / لتر). توجد أشكال نشطة بيولوجية أخرى من فيتامين أ (حمض الشبكية و retinoic) في الدم بتركيزات منخفضة جدا (أقل من 0.35 ميكرومول / لتر). على استرات من حسابات الريتينول ما يقرب من 5 ٪ من مجموع فيتامين (أ 0.1-0.1 μmol / لتر).

فيتامين (أ) له دور مهم في عمليات الحد من الأكسدة. يشجع الريتينول على تكوين الجليكوجين في الكبد والعضلات ، ويعزز زيادة الكولسترول في الدم ، ويشارك في تركيب هرمونات الستيرويد والجنس. هو مطلوب منها للنمو وتكوين عظام الهيكل العظمي إعادة التخليق من رودوبسين، ويسهم أيضا في الأداء الطبيعي للأغشية المخاطية وظهارة غطاء الجلد، ومنع للحؤول، فرط التقرن والنزع المفرط. فيتامين (أ) يساعد على تقوية الشعر والأسنان واللثة. في السنوات الأخيرة، لكنه يظهر دور متنوعة من فيتامين (أ) في الوقاية من السرطان وتنظيم المناعة (ضروري لاستكمال البلعمة، وزيادة توليف الإيج، ويحفز إنتاج الخلايا التائية القاتلة، ويحفز نوع T-المساعد الثاني وآخرون). فيتامين (أ) - أحد مضادات الأكسدة النشطة ، تعمل أساسا في وجود فيتامين (ه) ؛ يحمي فيتامين (ج) من الأكسدة. يعتبر نقص فيتامين أ أحد عوامل الخطر للأورام الخبيثة. في الدراسات التجريبية تبين أن زيادة محتوى فيتامين (أ) في النظام الغذائي يزيد من متوسط مدة الحياة بنسبة 17.5 ٪. الزنك هو عامل مساعد أساسي لعملية التمثيل الغذائي لفيتامين أ (ضروري لتكوين بروتين ربط فيتامين أ).

متوسط الاحتياجات اليومية للريتينول للبالغين (20-50 سنة) هو 1.2 ملغ (4000 وحدة دولية ، 1 وحدة دولية تعادل 0.3 ميكروغرام ريتينول) ، للنساء الحوامل - 1.5 ملغ (5000 وحدة دولية) ، للرضاعة الطبيعية - 1 ، 8 ملغم (6000 وحدة دولية) ، للأشخاص الذين تزيد أعمارهم عن 60 عامًا - 2.5 ميلي غرام (10،000 وحدة دولية). يجب تسليم ما لا يقل عن ثلث الاحتياجات اليومية للريتينول إلى الجسم في شكل جاهز ؛ يمكن امتصاص الباقي من خلال استخدام الكاروتينات ، التي تشكل أشكال الريتينول في الجسم. يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن ما يقرب من 30 ٪ من الريتينول في المواد الغذائية يتم تدميرها عن طريق المعالجة الحرارية. نشاط الريتينول هو أعلى مرتين من الكاروتين ، بالإضافة إلى أن الأخير يمتص 30-40٪ فقط في الأمعاء. لذلك ، في تقييم المدخول الغذائي ، يعتبر أن 1 ملغ من الريتينول تقابل تقريبا 6 ملغ من الكاروتينات.

تحديد الريتينول (فيتامين أ) والكاروتينات في مصل الدم وفقا لبيسي في تعديل LA Anisimova

مبدأ الطريقة

يعتمد تحديد الفيتامين A والكاروتينات على التحلل المائي في محلول الكحول القلوي ، يتبعه استخراج بمزيج من المذيبات العضوية.

الكواشف

• 11 م حل من هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH).
• 96 ٪ الكحول الإيثيلي.
• حل M 1 من هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH) في 96 ٪ من الكحول الإيثيلي: يتم خلط 1 حجم 11 M KOH مع 10 مجلدات من الكحول الإيثيل 96 ٪. يتم إعداد الكاشف في يوم الدراسة. إذا حدث تلطيخ أثناء المزج ، يجب تنظيف الكحول بالتقطير قبل الاستخدام.
• Xylol ، حصان.
• اوكتان ، h.ch.
• خليط زيلين أوكتان: يتم تحضيره عن طريق خلط كميات متساوية من الزيلين والأوكتان.

يتم إجراء التحقيقات على مقياس الطيف الضوئي.

مسار تحديد فيتامين أ

يضاف الدم المأخوذ من الإصبع (حوالي 1 مل) إلى بطاقة الطرد المركزي ويوضع في كوب زجاجي بماء دافئ (درجة الحرارة 40-45 درجة مئوية) لمدة 20-30 دقيقة. لفصل المصل ، يتم جلطة الدم بدقة حول حافة الأنبوب مع قضيب زجاجي رفيع ويتم طرده عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق.

حدد 0.12 مل من المصل ونقله إلى أنبوب تراص ، ثم أضف 0.12 مل من محلول هيدروكسيد البوتاسيوم 1 م كحول. محتويات اهتزت بعناية.

يتم وضع أنابيب الاختبار مع المسابير في حمام مائي لمدة 20 دقيقة عند درجة حرارة 60 درجة مئوية للتحلل المائي.

يتم تبريد العينات ويتم إضافة 0.12 مل من خليط زيلين-أوكتان إليهم ، ثم يهتز بقوة لمدة 10-15 ثانية. تبرد مرة أخرى وأجهزة الطرد المركزي.

قم بإزالة الطبقة العليا التي تحتوي على فيتامين أ والكاروتينات بعناية مع ماصة باستور مع علبة مطاطية ونقلها إلى ميكروسفتات.

العينات هي الطيفية الضوئية في الطول الموجي من 328 نانومتر - لتحديد فيتامين أ ، وعلى طول موجة من 460 نانومتر - لتحديد الكاروتينات.

بعد القياس الطيفي يخضع لعينة الدراسة للأشعة فوق البنفسجية لتدمير فيتامين A. لهذا الغرض، على مسافة 15-20 سم من microcuvettes الكوارتز مجموعة (جراثيم) مصباح بحيث التشعيع يتعرض جزء من كفيت، مليئة السائل. وقت التشعيع هو 45-60 دقيقة.

العينات هي الطيف الضوئي مرارا وتكرارا في الطول الموجي من 328 نانومتر. يتم تحديد محتوى فيتامين أ من الاختلاف في قيم الانقراض (الكثافة البصرية) ، مع الأخذ في الاعتبار معامل (عامل) 637 ، تحسب من قبل بيسي لفيتامين أ.

يتم الحساب وفقا للصيغة:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)) ،

حيث X هو محتوى فيتامين A ، ميكروغرام / ديسيلتر ؛ 637 هو المعامل المحسوب بواسطة Bessey لتحديد الفيتامين A ؛ Е328 (1) - الكثافة البصرية للمحل قبل التشعيع ؛ E328 (2) هي الكثافة البصرية للمحل بعد التشعيع.

معامل نقل تركيز فيتامين A من ميكروغرام / ديسيلتر في μmol / لتر هو 0.035.

يتم حساب محتوى الكاروتينات بواسطة الصيغة:

X = 480-Е480 ،

حيث X هو محتوى الكاروتينويدات ، ميكروغرام / ديسيلتر ؛ 480 هو المعامل المحسوب بواسطة Bessey لتحديد الكاروتينات. E480 هي الكثافة البصرية لمحلول الاختبار.

تعليق

وفقا ل Bessey ، يمكن أخذ كميات أكبر أو أصغر من المصل خلال الدراسات ، ولكن يجب أن تكون النسبة إلى حجم محلول الكحوليات ثابتة مع أي تغيير في حجم (كمية) من خليط الاسيلين أو الاوكتان.

المعيار في محتوى فيتامين أ في مصل الدم هو: في الأطفال حديثي الولادة والرضع - 160-270 ميكروغرام / لتر. في البالغين ، 1.05-2.45 μmol / لتر (300-700 ميكروغرام / لتر). محتوى الكاروتينات في مصل البالغين هو 800-2300 ميكروغرام / لتر.