اختبار الحساسية للمضادات الحيوية: الإعداد، وفك التشفير، ومقدار ما يتم إجراؤه

تزداد اليوم شعبية اختبارات حساسية المضادات الحيوية. تتميز البكتيريا البشرية بتنوعها الكبير، حيث تضم عددًا كبيرًا من الكائنات الدقيقة في بيئات حيوية مختلفة.

طورت شركات الأدوية عددًا كبيرًا من العوامل المضادة للبكتيريا، والمضادات الحيوية، التي تساعد في الحفاظ على نسبة وعدد طبيعيين من الميكروبات. مع بداية عصر المضادات الحيوية، شُفيت العديد من الأمراض التي كانت تُعتبر قاتلة سابقًا. لكن الكائنات الدقيقة تسعى أيضًا للبقاء على قيد الحياة، متكيفة تدريجيًا مع تأثير الأدوية المضادة للبكتيريا. مع مرور الوقت، اكتسب العديد منها مقاومة للعديد من الأدوية، وثبتت هذه المقاومة في جيناتها، وبدأت تنتقل من جيل إلى جيل. وبالتالي، تكون الكائنات الدقيقة الجديدة في البداية غير حساسة لبعض الأدوية، وقد يكون استخدامها غير فعال. يطور الصيادلة المزيد والمزيد من المنتجات الجديدة، ويضيفون إليها مكونات فعالة جديدة، ويغيرون تركيبتها الأساسية. لكن تدريجيًا، تتطور مقاومتها أيضًا.

غالبًا ما يكمن سبب زيادة مقاومة البكتيريا للعديد من الأدوية، وحتى نظائرها، في الاستخدام الخاطئ وغير المنضبط للمضادات الحيوية. يصف الأطباء المضادات الحيوية وتركيباتها لعلاج أمراض بكتيرية مختلفة. في الوقت نفسه، لا يوجد تقييم أولي لمدى فعاليتها، ولا يتم تحديد الجرعة المثلى، وهو أمر بالغ الأهمية للعلاج ومنع آليات تطور المقاومة. يصف الكثيرون العلاج المضاد للبكتيريا خطأً حتى في الأمراض الفيروسية، وهو علاج غير فعال، لأن المضاد الحيوي لا يؤثر على الفيروسات.

غالبًا ما يُوصف العلاج دون اختبار حساسية مسبق، ولا يُختار العامل الفعال والجرعة اللازمة لكل مرض أو بيئة حيوية محددة. ولأن المضادات الحيوية تُوصف "بشكل عشوائي"، غالبًا ما لا تُظهر أي فعالية ضد الكائنات الدقيقة المسببة للمرض، والتي تتطلب تقليل أعدادها. بل تؤثر على أنواع أخرى من البكتيريا، مما يؤدي إلى خلل في البكتيريا، وهو مرض خطير قد يؤدي إلى عواقب وخيمة. وتزداد خطورة الحالات التي يُدمر فيها المضاد الحيوي البكتيريا الطبيعية، المصممة لحماية الجسم والحفاظ على وظائفه الطبيعية. كما تُوصف جرعات زائدة أو قليلة من الدواء.

كما أن المرضى لا يتحملون مسؤولية العلاج. فكثيرًا ما يُوقف العلاج بعد زوال أعراض المرض. وفي الوقت نفسه، يُفضل الكثيرون عدم إكمال دورة العلاج كاملةً. وهذا أحد العوامل التي تُسهم في تطور مقاومة البكتيريا. صُممت دورة العلاج الكاملة للقضاء تمامًا على البكتيريا المُمرضة. وإذا لم تُكمل الدورة، فلن تُقضى عليها تمامًا. فالبكتيريا الناجية تُصاب بطفرة، وتُطور آلياتٍ تُوفر لها الحماية من هذا الدواء، وتنقله إلى الأجيال التالية. ويكمن الخطر في تطور المقاومة ليس فقط تجاه هذا الدواء تحديدًا، بل تجاه مجموعة الأدوية بأكملها.

لذلك، فإن إحدى أكثر الوسائل فعالية للعلاج العقلاني والوقاية من المقاومة اليوم هي التحديد الأولي للحساسية للدواء الموصوف واختيار الجرعة المثلى منه.

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]، [ 5 ]، [ 6 ]، [ 7 ]، [ 8 ]

مؤشرات لهذا الإجراء اختبارات الحساسية للمضادات الحيوية

عادةً، يُجرى هذا التحليل في جميع الحالات التي تستدعي العلاج بالمضادات الحيوية. واستنادًا إلى القواعد الأساسية للعلاج بالمضادات الحيوية، لا يمكن وصف أي مضاد حيوي إلا بعد إجراء تقييم أولي لحساسية البكتيريا لهذا العامل، وتحديد التركيز الأمثل للمادة الفعالة في ظروف مختبرية. عمليًا، ولأسباب وظروف مختلفة، لا تُجرى هذه الدراسة قبل بدء العلاج، ويضطر الطبيب لاختيار الدواء "عشوائيًا".

اليوم، لا يُجرى اختبار الحساسية إلا في الحالات التي يشك فيها الطبيب جديًا في فعالية الدواء الموصوف، وفي حالات عدم فعالية الدواء لفترة طويلة، وكذلك عند استخدام الدواء نفسه بشكل متكرر لفترة زمنية محدودة. غالبًا ما تُحدد الحساسية في علاج الأمراض المنقولة جنسيًا. يلجأ العديد من المتخصصين إلى التحليل في حالة ظهور آثار جانبية، أو ردود فعل تحسسية، أو عند الحاجة إلى استبدال دواء بآخر.

يُستخدم التحليل أيضًا في كثير من الأحيان لاختيار الأدوية المُخصصة للعلاج بالمضادات الحيوية خلال فترة التعافي بعد العمليات الجراحية، والتدخلات التنظيرية، واستئصال الأعضاء. في أقسام الجراحة وجراحة القيح، تُعد هذه الدراسة ضرورية للغاية، نظرًا لتطور المقاومة بسرعة كبيرة. بالإضافة إلى ذلك، تتطور مقاومة شديدة "مكتسبة من المستشفى". تُولي العديد من العيادات الخاصة مسؤولية كاملة لوصف الأدوية - فقط بعد التحقق من حساسيتها. في كثير من الحالات، لا تسمح ميزانية المؤسسات الحكومية بإجراء مثل هذه الدراسات لكل مريض يحتاج إلى علاج بالمضادات الحيوية.

[ 9 ]، [ 10 ]، [ 11 ]

تجهيز

لا يتطلب التحضير للدراسة أي إجراءات خاصة، فهو مماثل لأي فحوصات أخرى. قبل الدراسة ببضعة أيام، يُنصح بالامتناع عن تناول الكحول. في صباح يوم جمع العينة، يُمنع في معظم الحالات تناول الطعام أو الشراب. لكن كل شيء يعتمد على نوع التحليل. قد تختلف مادة الدراسة باختلاف المرض.

في حالات أمراض الحلق والجهاز التنفسي، تُؤخذ مسحة من الحلق والأنف. في حالات الأمراض التناسلية وأمراض النساء والمسالك البولية، تُؤخذ مسحات من الأعضاء التناسلية وعينات من الدم للتحليل. في حالات أمراض الكلى، غالبًا ما يُطلب فحص البول. في حالات أمراض الجهاز الهضمي وبعض الأمراض المعدية، يُفحص البراز والقيء. أحيانًا، يُمكن فحص حليب الثدي، وإفرازات الأنف، وإفرازات العين، واللعاب، والبلغم. في حالات الأمراض الشديدة والاشتباه في وجود عدوى، يُفحص حتى السائل النخاعي. نطاق الفحوصات واسع جدًا.

تُحدد خصائص جمع المادة بناءً على انتمائها البيولوجي. لذلك، يُجمع البول والبراز صباحًا في وعاء نظيف أو في وعاء مخصص للمواد البيولوجية. يُجمع حليب الثدي قبل الرضاعة. يُؤخذ الجزء الأوسط للفحص. تُجمع اللطاخة باستخدام مسحة خاصة تُمرر على الأغشية المخاطية، ثم تُغمس في أنبوب اختبار مع وسط مُجهز. يُجمع الدم في أنبوب اختبار من إصبع أو وريد. عند جمع اللطاخات من مجرى البول أو المهبل، يُنصح بالامتناع عن الجماع لعدة أيام.

عند جمع المواد البيولوجية لأغراض البحث، من الضروري أولاً وقبل كل شيء ضمان الجمع الصحيح والتعقيم. ولكن في معظم الحالات، يقع هذا على عاتق الطاقم الطبي، فلا داعي للقلق بشأنه. في أغلب الأحيان، يلجأ أطباء أمراض النساء والمسالك البولية إلى هذه الدراسات، يليهم أطباء الأنف والأذن والحنجرة في علاج أمراض البلعوم الأنفي والبلعوم والجهاز التنفسي العلوي.

[ 12 ]، [ 13 ]، [ 14 ]

تقنية اختبارات الحساسية للمضادات الحيوية

تُسلَّم المادة البيولوجية المُجمَّعة إلى المختبر في ظروف معقمة، حيث تُجرى أبحاث إضافية. أولًا، تُزرع المادة أولًا على أوساط غذائية شاملة. كما يُؤخذ جزء من المادة للفحص المجهري. تُحضَّر عينة للفحص المجهري، وتُجرى دراسة تُمكِّن من تحديد صورة تقريبية، وتحديد الكائنات الدقيقة الموجودة في العينة. هذا يُتيح اختيار البيئات المثلى لإجراء المزيد من الأبحاث وتحديد الكائنات الدقيقة. كما يُمكن رؤية علامات الالتهاب والورم في الفحص المجهري.

على مدار عدة أيام، تنمو مستعمرات من الكائنات الدقيقة في طبق بتري. بعد ذلك، تُؤخذ عدة مستعمرات وتُنقل إلى بيئات غذائية مختارة، مما يُمكّن من تحديد مجموعة تقريبية من الكائنات الدقيقة. تُحضن هذه المستعمرات لعدة أيام في منظم حرارة، ثم يبدأ تحديد نوع الكائن الدقيق. يُجرى التحديد باستخدام اختبارات بيوكيميائية وجينية خاصة، بالإضافة إلى مُعرّفات. كما يُمكن إجراء دراسات مناعية.

بعد عزل العامل الممرض الرئيسي، تُقيَّم حساسيته للمضادات الحيوية. هناك عدة طرق لذلك. الطريقة الأكثر شيوعًا هي التخفيف التسلسلي، أو طريقة الانتشار القرصي. تُوصف هذه الطرق بالتفصيل في المراجع الميكروبيولوجية، والمبادئ التوجيهية، ومعايير المختبرات.

جوهر طريقة انتشار الأقراص هو زرع الكائنات الدقيقة المحددة في وسط غذائي، ثم وضع أقراص خاصة مغموسة بالمضادات الحيوية فوقها. تُحضّن البذرة في منظم حرارة لعدة أيام، ثم تُقاس النتائج. تُقيّم درجة تثبيط نمو البكتيريا بواسطة كل مضاد حيوي. إذا كانت البكتيريا حساسة للمضاد الحيوي، تتشكل "منطقة انحلال" حول القرص، حيث لا تتكاثر البكتيريا، ويكون نموها بطيئًا أو معدومًا تمامًا. يُستخدم قطر منطقة تثبيط النمو لتحديد درجة حساسية الكائنات الدقيقة للمضاد الحيوي، ولوضع توصيات إضافية.

طريقة التخفيف التسلسلي هي الأكثر دقة. ويتم ذلك بزرع الكائنات الدقيقة على وسط مغذي سائل، ثم إضافة مضاد حيوي مخفف وفقًا لنظام التخفيف العشري. بعد ذلك، توضع أنابيب الاختبار في منظم حرارة (ثرموستات) للحضانة لعدة أيام. وتُحدد حساسية المضادات الحيوية من خلال درجة نمو البكتيريا في المرق المغذي مع إضافة المضادات الحيوية. ويُسجل الحد الأدنى للتركيز الذي لا تزال الكائنات الدقيقة تنمو عنده، وهو الحد الأدنى لجرعة الدواء (مع ضرورة إعادة حساب الوحدات الميكروبيولوجية للمادة الفعالة).

هذه هي الطرق الميكروبيولوجية القياسية التي تُشكل أساس أي بحث. وهي تتطلب إجراء جميع العمليات يدويًا. واليوم، تُجهّز العديد من المختبرات بمعدات خاصة تُجري جميع هذه الإجراءات تلقائيًا. ويكفي الأخصائي الذي يستخدم هذه المعدات أن يكون لديه القدرة على استخدامها، وأن يلتزم بقواعد السلامة والتعقيم.

من الضروري مراعاة اختلاف مؤشرات الحساسية في الظروف المختبرية وفي الكائنات الحية اختلافًا كبيرًا. لذلك، يُوصف للشخص جرعة أعلى من الجرعة المحددة أثناء الدراسة. ويرجع ذلك إلى عدم امتلاك الجسم لظروف مثالية لنمو البكتيريا. في المختبر، تُهيأ "ظروف مثالية". يمكن تحييد جزء من الدواء بتأثير اللعاب وعصارة المعدة، بينما يُحايد جزء آخر في الدم بواسطة الأجسام المضادة ومضادات السموم التي ينتجها الجهاز المناعي.

اختبار حساسية المضادات الحيوية في البول

أولاً، تُجمع المادة البيولوجية. للقيام بذلك، يُجمع الجزء الأوسط من بول الصباح ويُرسل إلى المختبر. من المهم الحفاظ على التعقيم وعدم تناول المضادات الحيوية لعدة أيام قبل التحليل، وإلا فقد تُعطى نتيجة سلبية خاطئة. بعد ذلك، تُجرى عملية بذر قياسية، تتمثل في عزل مزرعة نقية من العامل الممرض واختيار مضاد حيوي ذي تأثير مُبيد للجراثيم الأمثل. يُحدد التركيز المطلوب للمضاد الحيوي.

يُنصح عادةً بتحليل البول عند الاشتباه في وجود عملية معدية والتهابية في الجهاز البولي التناسلي، مع وجود نقص مناعي واضطرابات أيضية. عادةً ما يكون البول سائلاً معقماً. تتراوح مدة هذه الدراسة بين يوم وعشرة أيام، وتُحدد بناءً على معدل نمو الكائن الدقيق.

اختبار الثقافة وحساسية المضادات الحيوية

تتضمن الدراسة عزل الكائن الدقيق المُمرض في مزرعة نقية. قد توجد أحيانًا عدة كائنات دقيقة من هذا النوع (عدوى مختلطة). بعض الكائنات الدقيقة قادرة على تكوين أغشية حيوية، وهي نوع من "المجتمعات الميكروبية". معدل بقاء الأغشية الحيوية أعلى بكثير من معدل بقاء الكائنات الدقيقة المفردة أو المجموعات. بالإضافة إلى ذلك، ليست كل المضادات الحيوية قادرة على التأثير على الأغشية الحيوية واختراقها.

لتحديد العامل الممرض، وعزله في مزرعة نقية، تُجرى عملية البذر. خلال الدراسة، تُجرى عدة عمليات بذر في بيئات غذائية متنوعة. بعد ذلك، تُعزل المزرعة النقية، ويُحدد انتماؤها البيولوجي، وتُحدد حساسيتها للمضادات الحيوية. ويُختار التركيز الأمثل.

يمكن استخدام أي مادة بيولوجية في الدراسة، حسب نوع المرض وموقع العملية المعدية. وتُحدد مدة الدراسة بمعدل نمو الكائنات الدقيقة.

[ 15 ]، [ 16 ]، [ 17 ]، [ 18 ]، [ 19 ]، [ 20 ]

اختبار حساسية البراز

يُفحص البراز في مختلف أمراض المعدة والأمعاء، وفي حالة الاشتباه في وجود عدوى، أو تسمم بكتيري، أو تسمم غذائي. الهدف من الدراسة هو عزل العامل الممرض واختيار مضادات البكتيريا المثلى له، والتي تتميز بنشاط عالٍ. تكمن أهمية هذا النوع من الدراسات في إمكانية اختيار دواء يؤثر فقط على العامل الممرض دون التأثير على البكتيريا السليمة.

المرحلة الأولى والمهمة للغاية هي جمع البراز. يجب جمعه في وعاء معقم خاص صباحًا. يجب حفظه لمدة لا تزيد عن ساعة إلى ساعتين. على النساء اللواتي يعانين من نزيف الحيض تأجيل التحليل حتى النهاية، لأن دقة النتائج قد تتغير. تُرسل العينة إلى المختبر للفحص. يُجرى التحليل باستخدام تقنيات ميكروبيولوجية قياسية، تتضمن بذر وعزل مزرعة نقية. كما يُجرى اختبار للمضادات الحيوية. بناءً على النتيجة، تُوضع التوصيات، ويُحدد مخطط الدراسة اللاحقة.

[ 21 ]، [ 22 ]، [ 23 ]، [ 24 ]

تحليل خلل التوازن البكتيري مع الحساسية

مادة الدراسة هي عينات براز مأخوذة مباشرةً بعد التبرز. تتكون البكتيريا الطبيعية في الجهاز الهضمي من أنواع البكتيريا الطبيعية وعدد من البكتيريا الممرضة. يُحدد تركيبها النوعي وكميتها ونسبها بدقة، وتُحافظ عليها ضمن المعدل المسموح به. في حال اضطراب هذه النسبة، يُصاب الشخص بخلل التوازن البكتيري. يمكن أن تظهر هذه الحالة بأشكال مختلفة. يمكن أن تتطور الأمراض المُعدية إذا زادت كمية البكتيريا الممرضة بشكل حاد. إذا انخفضت كمية أي كائن دقيق بشكل حاد، فإن المساحة الخالية تشغلها بكتيريا أخرى غير نموذجية للجهاز الهضمي، أو ممرضة. غالبًا ما تشغل الفطريات المساحة الخالية، ثم تتطور عدوى فطرية مختلفة وداء المبيضات.

لتحديد التركيب الكمي والنوعي للبكتيريا المعوية، يُجرى تحليل براز للكشف عن خلل التوازن البكتيري. عادةً ما تُقسّم جميع الكائنات الحية الدقيقة التي تعيش في الأمعاء إلى ثلاث مجموعات: ممرضة، وانتهازية، وغير ممرضة. وبناءً على ذلك، يتكون التحليل من ثلاثة أجزاء. لكل مجموعة من الكائنات الحية الدقيقة احتياجاتها الخاصة من مصدر غذائي، وهو الطاقة. وتتطلب كل مجموعة أوساطًا غذائية منفصلة وإضافات غذائية مختارة.

أولاً، تُجرى عملية الفحص المجهري والتلقيح الأولي. بعد ذلك، تُختار أكبر المستعمرات، المتشابهة في خصائصها المورفولوجية مع مُمثلي كل مجموعة. تُنقل هذه المستعمرات إلى بيئات مختارة. بعد نمو الكائنات الدقيقة، تُحدد وتُختبر حساسيتها للمضادات الحيوية فورًا. تُستخدم الطرق الميكروبيولوجية القياسية.

تتضمن دراسة مجموعة من الكائنات الدقيقة المُمرضة، بالإضافة إلى الدراسات القياسية، تحديد بكتيريا التيفوئيد ونظيرة التيفوئيد والزحار. كما يُحدد ما إذا كان الشخص حاملاً لهذه الكائنات الدقيقة. تتضمن الدراسة الشاملة لخلل التوازن البكتيري دراسةً لممثلي مجموعة البكتيريا المشقوقة والعصيات اللبنية. تستغرق الدراسة حوالي أسبوع وتعتمد على معدل نمو الكائنات الدقيقة.

[ 25 ]، [ 26 ]، [ 27 ]، [ 28 ]، [ 29 ]

اختبار حساسية البكتيريا

في حالات العدوى المعوية، تُستخدم العاثيات غالبًا للعلاج بدلًا من المضادات الحيوية. العاثيات هي فيروسات بكتيرية حساسة لها فقط. تجد البكتيريا التي تُكملها، فتخترقها وتدمر الخلية البكتيرية تدريجيًا. ونتيجةً لذلك، تتوقف عملية العدوى. ولكن ليست كل البكتيريا حساسة للعاثيات. للتحقق من فعالية عاثية معينة تجاه البكتيريا، يجب إجراء تحليل.

مادة الدراسة هي البراز. يجب تسليم التحليل إلى المختبر خلال ساعة، وإلا فسيكون من المستحيل إجراؤه. من الضروري إجراء التحليل على عدة مراحل. الطريقة الأولية مشابهة لتلك المستخدمة لتحديد الحساسية للمضادات الحيوية. أولاً، يُجرى فحص مجهري أولي للعينة، ثم تُزرع أوليًا على أوساط غذائية عامة. بعد ذلك، تُعزل مزرعة نقية على أوساط غذائية انتقائية.

يتم العمل الرئيسي باستخدام مزرعة نقية، وتُعالَج بأنواع مختلفة من البكتيريا العاثية. إذا انحلت المستعمرة (انحلت)، فهذا يدل على نشاط عالٍ للبكتيريا العاثية. أما إذا كان الانحلال جزئيًا، فإن البكتيريا العاثية تعمل بشكل معتدل. في حال عدم حدوث انحلال، يمكن الحديث عن مقاومة للبكتيريا العاثية.

ميزة العلاج بالعاثيات هي أن العاثيات لا تؤثر على جسم الإنسان ولا تسبب آثارًا جانبية. فهي تلتصق بأنواع معينة من البكتيريا وتحللها. عيبها هو أنها شديدة التخصص ولها تأثير انتقائي، ولا يمكنها دائمًا الالتصاق بالبكتيريا.

[ 30 ]، [ 31 ]، [ 32 ]، [ 33 ]، [ 34 ]، [ 35 ]، [ 36 ]، [ 37 ]، [ 38 ]

تحليل البلغم لحساسية المضادات الحيوية

التحليل هو دراسة إفرازات الجهاز التنفسي السفلي. الهدف هو تحديد نوع الكائنات الدقيقة المسببة للمرض. كما يُجرى تحليل للمضادات الحيوية. في هذه الحالة، يُحدد مدى حساسية العامل الممرض للمضادات الحيوية، ويُختار التركيز الأمثل. يُستخدم هذا التحليل في علاج أمراض الجهاز التنفسي.

يُعد فحص البلغم ومحتويات الرئتين والشعب الهوائية ضروريًا لاختيار خطة العلاج والتمييز بين التشخيصات المختلفة. ويُستخدم لتأكيد أو نفي وجود مرض السل.

أولًا، من الضروري الحصول على المادة البيولوجية. يمكن الحصول عليها عن طريق السعال، أو البلغم، أو بسحبها من القصبة الهوائية أثناء تنظير القصبات. هناك رذاذ خاص يُعزز عملية البلغم. قبل سحب البلغم، يجب غسل الفم بالماء، مما يقلل من التلوث البكتيري في تجويف الفم. أولًا، يُنصح بأخذ ثلاثة أنفاس عميقة والسعال المُنتج للبلغم. يمكن أيضًا سحب البلغم بالشفط من القصبة الهوائية. في هذه الحالة، تُدخل قسطرة خاصة في القصبة الهوائية. أثناء تنظير القصبات، يُدخل منظار قصبي في التجويف القصبي. في هذه الحالة، يُدهن الغشاء المخاطي بمخدر.

تُرسل المادة بعد ذلك إلى المختبر للفحص. تُجرى عملية البذر والفحص المجهري القياسيين. ثم تُعزل عينة نقية وتُجرى عليها المزيد من المعالجات. يُجرى اختبار للمضادات الحيوية، مما يُمكّن من تحديد حساسية البكتيريا واختيار الجرعة المثلى.

في حال الاشتباه بالإصابة بالسل، يُفحص البلغم الصباحي لمدة ثلاثة أيام. عند إجراء اختبار السل، تكون النتيجة جاهزة خلال 3-4 أسابيع. لأن بكتيريا السل، وهي العامل المسبب للمرض، تنمو ببطء شديد.

عادةً، يجب الكشف عن وجود بكتيريا سليمة في الجهاز التنفسي. كما يجب مراعاة أن انخفاض المناعة قد يؤدي إلى اختلاف مؤشرات البكتيريا السليمة.

تحليل الحيوانات المنوية لحساسية المضادات الحيوية

هو دراسة بكتيرية لقذف الحيوانات المنوية، مع اختيار المضادات الحيوية الحساسة وتركيزاتها. يُستخدم هذا الفحص غالبًا لعلاج العقم وأمراض الجهاز التناسلي الذكري الأخرى. في حال كان المرض مصحوبًا بعملية معدية، فإن السبب الرئيسي لعقم الذكور في معظم الحالات هو العدوى. عادةً ما يُجرى فحص السائل المنوي في البداية. بناءً على النتائج، تُحدد قدرة الحيوانات المنوية على الإخصاب. إذا وُجد عدد كبير من كريات الدم البيضاء في هذا التحليل، فيمكننا الحديث عن عملية التهابية. في هذه الحالة، عادةً ما يُوصف تحليل ميكروبيولوجي على الفور، لأن الالتهاب غالبًا ما يكون مصحوبًا بعدوى. بناءً على النتائج، يُختار العلاج المناسب. عادةً ما يصف طبيب أمراض الذكورة هذه الدراسة.

التهاب البروستاتا والأمراض التناسلية من الأسباب أيضًا لإجراء التحليل. ويُنصح به أيضًا في حال اكتشاف مرض تناسلي لدى الشريك.

أساس التحليل الصحيح هو، أولاً وقبل كل شيء، الجمع الصحيح للمواد البيولوجية. تُجمع المواد في أوعية خاصة ذات عنق واسع. يجب أن تتوافق درجة حرارة التخزين مع درجة حرارة جسم الإنسان. في هذه الحالة، لا يمكن تخزين المواد لأكثر من ساعة. أما في حالتها المجمدة، فلا يمكن تخزينها لأكثر من يوم واحد. يُنصح بعدم إجراء مزرعة بكتيرية أثناء تناول المضادات الحيوية، لأن ذلك يُغير الصورة السريرية. عادةً، تُجرى المزرعة قبل بدء العلاج بالمضادات الحيوية، أو يُنصح بالتوقف عن تناول الأدوية قبل يومين إلى ثلاثة أيام من التحليل.

ثم تُزرع في وسط مغذٍّ، وتُحضن في منظم حرارة لمدة يوم إلى يومين. بعد ذلك، تُعزل مزرعة نقية، ثم يُجرى تحديد الهوية، وتُحدد حساسية كل مستعمرة، بالإضافة إلى نوع ومعدل نموها. تُحدد حساسية كل مستعمرة للمضادات الحيوية في حال اكتشاف كائنات دقيقة ممرضة. يستغرق التحليل في المتوسط من 5 إلى 7 أيام.

[ 39 ]، [ 40 ]، [ 41 ]، [ 42 ]، [ 43 ]

اختبار حساسية الغلوتين

هناك العديد من الاختبارات التي يمكن استخدامها لتحديد الحساسية المناعية لمختلف المواد أو مسببات الأمراض. في السابق، كانت الطريقة الرئيسية هي إجراء اختبارات تعتمد على تفاعل تراص الأجسام المضادة والمستضدات. أما اليوم، فيقل استخدام هذه الاختبارات باستمرار، نظرًا لانخفاض حساسيتها بشكل كبير مقارنةً بالعديد من الطرق الحديثة، مثل اختبارات الغلوتين. وفي أغلب الأحيان، يتم اللجوء عمليًا إلى اختبار اللعاب لتحليل الغلوتين والبراز.

يُستخدم اختبار حساسية الغلوتين لتشخيص اضطرابات معوية مختلفة. ويعتمد على رد فعل الجهاز المناعي. في حال إضافة الغلوتين إلى البراز، يحدث رد الفعل أو يختفي. تُعتبر هذه نتيجة إيجابية أو سلبية خاطئة. تشير النتيجة الإيجابية إلى استعداد للإصابة بالتهاب القولون، واحتمالية عالية للإصابة به. كما أنها تؤكد الإصابة بالداء البطني.

من الممكن أيضًا إجراء اختبار الغلوتين باستخدام اللعاب كمادة بيولوجية. يمكن قياس كمية الأجسام المضادة للغليادين. تشير النتيجة الإيجابية إلى حساسية الغلوتين، مما قد يشير إلى احتمالية عالية للإصابة بمرض السكري. إذا كانت نتيجة كلا الاختبارين إيجابية، فيمكن تأكيد الإصابة بمرض السكري أو الداء البطني.

[ 44 ]، [ 45 ]

اختبار حساسية الكلاميديا للمضادات الحيوية

يُجرى التحليل لعلاج الأمراض المعدية والالتهابية في الجهاز البولي التناسلي، في حال الاشتباه بالكلاميديا. عينة الدراسة عبارة عن كشط من الغشاء المخاطي المهبلي - لدى النساء، ومسحة من مجرى البول - لدى الرجال. يتم جمع العينة في غرفة العمليات باستخدام معدات ذات استخدام واحد فقط. من المهم الحفاظ على التعقيم. قبل جمع العينة، يُنصح بالامتناع عن العلاقة الحميمة لمدة يوم أو يومين قبل بدء الدراسة. في حال كانت المرأة حائضًا، تُجمع العينة بعد 3 أيام من انتهائها.

تُسلَّم المادة إلى المختبر. يتضمن التحليل الكامل فحصًا مجهريًا أوليًا للطاخة. يُتيح ذلك تحديد البكتيريا الدقيقة بصريًا من خلال السمات المورفولوجية واختيار الوسط الغذائي المناسب. قد يُشير محتوى المخاط والقيح والجزيئات الظهارية، بشكل مباشر أو غير مباشر، إلى تطور عملية التهابية أو تنكس خبيث للخلايا.

بعد ذلك، تُجرى عملية البذر الأولي. تُحضن المزرعة لعدة أيام في منظم حرارة، ويُجرى تحديدها بناءً على خصائصها الزراعية. بعد ذلك، تُنقل المزرعة إلى أوساط غذائية مختارة مُخصصة لزراعة الكلاميديا. تُحدد المستعمرات الناتجة باستخدام الاختبارات الكيميائية الحيوية. بعد ذلك، تُحدد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية باستخدام الطرق القياسية. يُختار المضاد الحيوي الأكثر حساسية وتركيزه. يتطلب زراعة الكلاميديا أوساطًا خاصة مُطورة خصيصًا لهذا النوع من الكائنات الدقيقة، تحتوي على جميع المواد وعوامل النمو اللازمة.

من الممكن أيضًا إجراء دراسة باستخدام طريقة بيولوجية. للقيام بذلك، تُصاب الفئران بالممرض. في بعض المختبرات، تُستخدم مزارع أنسجة مُعدّة خصيصًا بدلًا من الفئران. ويرجع ذلك إلى أن الكلاميديا طفيليات داخل الخلايا، وتتطلب ظروفًا خاصة لزراعتها. بعد ذلك، تُحدَّد الكائنات الدقيقة باستخدام طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). ولتحديد حساسيتها، تُزرع في وسط غذائي انتقائي للكلاميديا، وبعد بضعة أيام، تُسجَّل النتائج. تُقيَّم المقاومة أو الحساسية من خلال تثبيط العملية المعدية في الخلايا.

[ 46 ]، [ 47 ]، [ 48 ]، [ 49 ]، [ 50 ]، [ 51 ]، [ 52 ]، [ 53 ]

كم من الوقت يستغرق إجراء اختبار حساسية المضادات الحيوية؟

في المتوسط، يُجرى التحليل خلال 5-7 أيام. بعض التحاليل تستغرق وقتًا أطول. على سبيل المثال، عند تشخيص السل، قد يستغرق ظهور النتائج من 3 أسابيع إلى شهر. يعتمد الأمر برمته على معدل نمو الكائنات الدقيقة. غالبًا ما يضطر موظفو المختبر للتعامل مع الحالات التي يطلب فيها المرضى إجراء التحليل بشكل أسرع، بل ويعرضون "رسومًا إضافية" للحالات العاجلة. مع ذلك، يجب أن تفهم أنه في هذه الحالة، لا شيء يعتمد على تصرفات مساعد المختبر، بل يعتمد فقط على سرعة نمو الكائن الدقيق. لكل نوع معدل نموه الخاص والمحدد بدقة.

الأداء الطبيعي

لا توجد قيم معيارية عالمية مطلقة لجميع التحليلات. أولًا، قد تختلف هذه القيم باختلاف البيئة. ثانيًا، تختلف باختلاف الكائن الدقيق. أي أن القيم المعيارية لنفس الكائن الدقيق، مثلاً في الحلق والأمعاء، تختلف. فإذا كانت المكورات العنقودية الذهبية هي السائدة في الحلق كممثل للبكتيريا الطبيعية، فإن الإشريكية القولونية، والبيفيدوباكتريا، واللاكتوباكتريا هي السائدة في الأمعاء. كما قد تختلف قيم نفس الكائن الدقيق في بيئات مختلفة اختلافًا كبيرًا. على سبيل المثال، قد توجد المبيضات بشكل طبيعي بكمية معينة في البكتيريا البولية التناسلية، لكنها لا توجد عادةً في تجويف الفم. قد يشير وجود المبيضات في تجويف الفم إلى دخولها صناعيًا من بيئتها الطبيعية.

البول والدم والسائل الدماغي الشوكي بيئات بيولوجية ينبغي أن تكون معقمة عادةً، أي خالية من أي بكتيريا. وجود البكتيريا في هذه السوائل يدل على وجود عملية التهابية معدية قوية، كما يُشير إلى خطر الإصابة ببكتيريا الدم وتسمم الدم.

بشكل عام، يوجد تصنيف تقريبي. وحدة القياس في علم الأحياء الدقيقة هي وحدة تشكيل المستعمرات/مل، أي عدد وحدات تشكيل المستعمرات في مليلتر واحد من السائل الحيوي. تُحدد درجة التلوث بعدد وحدات تشكيل المستعمرات، وتتراوح في نطاق واسع بين 10 ^و 9 ^. وبناءً على ذلك، يُمثل ¹⁰ الحد الأدنى لعدد الكائنات الدقيقة، بينما يُمثل 10 و ⁹ درجة شديدة من العدوى. في الوقت نفسه، يُعتبر النطاق الذي يصل إلى 10 و ³ طبيعيًا، وجميع المؤشرات التي تزيد عن هذا العدد تُشير إلى تكاثر مرضي للبكتيريا.

فيما يتعلق بحساسية المضادات الحيوية، تُصنف جميع الكائنات الدقيقة إلى مقاومة، وحساسة بدرجة متوسطة، وحساسة. غالبًا ما تُعبّر هذه النتيجة عن سمة نوعية تُشير إلى الحد الأدنى للجرعة المثبطة للمضاد الحيوي، والتي لا تزال تُثبّط نمو الكائن الدقيق. تختلف هذه المؤشرات باختلاف كل شخص، وكذلك كل كائن دقيق.

[ 54 ]، [ 55 ]، [ 56 ]، [ 57 ]

الجهاز للتحليل

عند إجراء الدراسات البكتريولوجية، وخاصةً لتحديد الحساسية للمضادات الحيوية، لا يكفي جهاز واحد. لذا، من الضروري تجهيز مختبر البكتريولوجيا بمعدات متكاملة وشاملة. ومن الضروري التخطيط الدقيق واختيار المعدات المناسبة لكل مرحلة من مراحل البحث. وفي مرحلة جمع المواد البيولوجية، تُعد الأدوات المعقمة، والصناديق، والحاويات، وغرف التخزين، ومعدات النقل اللازمة لتوصيل المواد إلى المختبر، ضرورية.

في المختبر، ستحتاج أولًا إلى مجهر عالي الجودة لإجراء فحص المسحة. يتوفر اليوم عدد كبير من المجاهر ذات الخصائص المتنوعة، بدءًا من مجاهر الضوء التقليدية وصولًا إلى مجاهر تباين الطور ومجاهر القوة الذرية. تتيح لك المعدات الحديثة مسح صورة في فضاء ثلاثي الأبعاد وفحصها بتكبير عالٍ وبدقة عالية.

في مرحلة تلقيح وحضانة الكائنات الدقيقة، قد يلزم استخدام أجهزة التعقيم، وخزانات التسخين الجاف، والمجففات، وحمامات البخار، وجهاز الطرد المركزي. كما يلزم وجود منظم حرارة، حيث تتم عملية الحضانة الرئيسية للمواد البيولوجية.

في مرحلة تحديد الكائنات الحية الدقيقة وإجراء اختبار المضادات الحيوية، قد تكون هناك حاجة إلى أجهزة دقيقة، وأجهزة مطياف الكتلة، وأجهزة قياس الطيف الضوئي، وأجهزة قياس اللون لإجراء حسابات مختلفة وتقييم الخصائص الكيميائية الحيوية للثقافات.

بالإضافة إلى ذلك، يمكن تجهيز المختبرات الحديثة بمعدات عالية التقنية تُجري جميع مراحل البحث الرئيسية المذكورة أعلاه، وصولاً إلى حساب النتائج آليًا. تشمل هذه الأجهزة، على سبيل المثال، جهازًا معقدًا للمختبر البكتريولوجي يعتمد على مطياف كتلة زمن الرحلة. يتيح هذا الخط من الأجهزة تقسيم مساحة المختبر بأكملها إلى ثلاث مناطق. المنطقة الأولى مخصصة للفحص الملوث، حيث يتم استلام العينات وتسجيلها. المنطقة الثانية هي منطقة العمل، حيث تُجرى الأبحاث الميكروبيولوجية الرئيسية. أما المنطقة الثالثة فهي التعقيم والأوتوكلاف، حيث يتم تحضير مواد العمل والتخلص منها.

تتيح هذه النماذج الحضانة في نطاق واسع من درجات الحرارة والظروف. وتحتوي على جهاز تحليل مدمج للدم وعينات بيولوجية أخرى، مما يُعطي نتائج عالية الدقة والموثوقية. تتضمن المجموعة موازين إلكترونية، وأجهزة تقطير ثنائية، وأجهزة طرد مركزي، وأوتوكلاف، وخزانات تعقيم، وفرن متوسط أوتوماتيكي، وحمام مائي مزود بمحرك مدمج، وأجهزة قياس درجة الحموضة، ومقاييس حرارة، ومجاهر.

يُستخدم أيضًا جهاز تحليل ميكروبيولوجي، تُوضع فيه العينات المراد فحصها، والوسائط الغذائية، ومجموعات اختبارات الحساسية. يُجري الجهاز الدراسات اللازمة ويُصدر استنتاجًا جاهزًا.

رفع وخفض القيم

لا يمكن إلا للطبيب فك رموز التحليل. ولكن في كثير من الأحيان، يصاب المرضى بالذعر بعد تلقي النتائج، حيث يلاحظون عددًا كبيرًا من الرموز والأرقام غير المفهومة. ولكي لا تضيع، يُنصح بأن يكون لديك على الأقل فكرة عامة عن كيفية فك رموز تحليل الحساسية للمضادات الحيوية. عادةً، يشير العنصر الأول في النتائج إلى اسم الكائن الحي الدقيق الذي يُعد العامل المسبب للمرض. يُعطى الاسم باللاتينية. يمكن أن يشير أيضًا إلى ممثل للبكتيريا الدقيقة الطبيعية السائدة في الجسم، لذلك لا داعي للذعر. يشير العنصر الثاني إلى درجة البذر، أي عدد الكائنات الحية الدقيقة. عادةً ما يتراوح هذا الرقم من 10 ¹ إلى 10 ^9. يشير العنصر الثالث إلى شكل الإمراض، والرابع - أسماء الأدوية المضادة للبكتيريا التي يكون هذا الكائن الدقيق حساسًا لها. يُشار إلى الحد الأدنى للتركيز المثبط، الذي يتم عنده قمع نمو الكائن الدقيق، في مكان قريب.

[ 58 ]، [ 59 ]، [ 60 ]، [ 61 ]، [ 62 ]، [ 63 ]