تحليل جزء طول تقييد القيد

إن الاستخدام الواسع للعديد من نوكليازات القوقاز المغلقة لتحليل الحمض النووي الكروموسومي كشف عن تباين ضخم في الجينوم البشري. حتى التغيرات الصغيرة في مناطق الترميز والجزيئات التنظيمية للجينات الإنشائية يمكن أن تؤدي إلى إنهاء تركيب بروتين معين أو فقدان وظيفته في جسم الإنسان ، والذي يؤثر عادة على النمط الظاهري للمريض. ومع ذلك ، فإن ما يقرب من 90٪ من الجينوم البشري يتكون من تتابعات غير ترميزية أكثر تنوعًا وتحتوي على العديد من ما يسمى الطفرات المحايدة ، أو تعدد الأشكال ، وليس لها تعبير ظاهري. تستخدم هذه المواقع متعددة الأشكال (loci) في تشخيص الأمراض الوراثية كمؤشرات وراثية. توجد مواضع متعددة الأشكال في جميع الكروموسومات وترتبط بمنطقة محددة من الجين. بعد تحديد موقع موضع متعدد الأشكال ، من الممكن تحديد أي جينوم يرتبط بطفرة تسبب المرض في المريض.

لعزل مناطق متعددة من الحمض النووي ، تستخدم الأنزيمات البكتيرية - إنزيمات تقييد ، منتج منها مواقع تقييد. إن الطفرات التلقائية التي تحدث في مواقع متعددة الأشكال تجعلها مقاومة أو ، على العكس ، حساسة لعمل أنزيم محدد.

يمكن الكشف عن التغير الطفري في مواقع التقييد من خلال تغيير طول شظايا الحمض النووي المقيدة ، عن طريق فصلها باستخدام الرحلان الكهربي والتهجين اللاحق باستخدام مسابر محددة من الدنا. في حالة عدم وجود قيود في موقع متعدد الأشكال ، سيتم الكشف عن جزء كبير على الكواكب الكهربائية ، وإذا كان موجودًا ، فستكون هناك شظية أصغر. إن وجود أو عدم وجود موقع تقييد في الموقع المتطابق للكروموسومات المتماثلة يجعل من الممكن تصنيف الجين الطافر والعيني بشكل موثوق وتتبع انتقاله إلى النسل. وهكذا ، في دراسة الحمض النووي للمرضى ، في كل من الكروموسومات التي يوجد فيها موقع تقييد في منطقة متعددة الأشكال ، سيتم الكشف عن أجزاء صغيرة من الحمض النووي على الكواكب الكهربائية. في المرضى متماثل الزيجوت لطفرة التي تعدل موقع تقييد متعددة الأشكال ، سيتم الكشف عن أجزاء من طول أكبر ، وفي شظايا متخالف ، سيتم الكشف عن شظايا قصيرة وطويلة.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]