تنميط نووي

لدراسة الكروموسومات ، غالباً ما تستخدم مزارع الدم على المدى القصير ، وكذلك خلايا نخاع العظام والثقافات الليفية. يخضع الدم الذي يتم تسليمه إلى المختبر باستخدام مضاد التخثر إلى الطرد المركزي لتهطال خلايا الدم الحمراء ، ويتم تحضين الكريات البيض في وسط المزرعة لمدة 2-3 أيام. يضاف Phytohemagglutinin إلى عينة الدم ، لأنه يسرع تراص الكريات الحمراء ويحفز تقسيم الخلايا الليمفاوية. المرحلة الأكثر ملاءمة لدراسة الكروموسومات هي الطورية من الانقسام الفتيلي ، لذلك يستخدم الكولشيسين لوقف تقسيم الخلايا الليمفاوية في هذه المرحلة. إضافة هذا الدواء إلى الثقافة يؤدي إلى زيادة في نسبة الخلايا التي تكون في الطورية ، أي في هذه المرحلة في دورة الخلية ، عندما تكون أفضل رؤية للكروموسومات. يتناسخ كل كروموسوم (ينتج نسخته الخاصة) وبعد التلوين المناسب يكون مرئياً في صورة صبغيين مرتبطين بالمركز المركزي أو الانقباض المركزي. ثم يتم علاج الخلايا بمحلول كلوريد الصوديوم ناقص التوتر ، ثابت وملون.

بالنسبة لصبغ الكروموسومات ، فإن صبغة رومانوفسكي-غيمسا ، أو 2 ٪ من الأسيتامينوماين أو 2 ٪ من الأسيتازارين غالباً ما تستخدم. صبغ الكروموسومات بالكامل ، بشكل موحد (الطريقة الروتينية) ويمكن استخدامها لتحديد الحالات الشاذة العددية للكروموسومات البشرية.

للحصول على صورة مفصلة لبنية الكروموسومات ، تحديد (تحديد) الكروموسومات الفردية أو شرائحها ، يتم استخدام طرق مختلفة للتلطيخ التفاضلي. والطرق الأكثر شيوعًا هي Giemsa ، وكذلك G-and Q-bending. ويكشف الفحص المجهري للدواء على طول الصبغي عن سلسلة من العصابات الملطخة (غير المتغايرة) وغير المبطنة (euchromatin). إن طبيعة الخط المستعرض الذي تم الحصول عليه في هذه الحالة تسمح بتحديد كل كروموسوم في المجموعة ، لأن تناوب المشارب وأحجامها تكون فردية وثابتة بشكل صارم لكل زوج.

يتم تصوير لوحات الطورية من الخلايا الفردية. يتم قطع الكروموسومات الفردية من الصور ولصقها على الورقة بالترتيب. تسمى هذه الصورة للكروموسومات بنمط كيميائي.

استخدام التلوين الإضافي ، بالإضافة إلى طرق جديدة للحصول على مستحضرات الكروموسومات ، والتي تسمح بتمديد الكروموسومات في الطول ، يزيد بشكل كبير من دقة التشخيص الخلوي الوراثي.

تم تطوير تسمية خاصة لوصف النمط النووي البشري. يتم تعيين النمط النووي العادي لرجل وامرأة في 46 ، XY و 46 ، XX ، على التوالي. في متلازمة داون ، التي تتميز بوجود كروموسوم 21 إضافي (التثلث الصبغي 21) ، يوصف النمط النووي للمرأة بأنه 47 ، XX 21+ ، والرجال - 47 ، XY ، 21+. في وجود شذوذ بنيوي للكروموسوم ، من الضروري الإشارة إلى ذراع طويلة أو قصيرة معدلة: الحرف p يدل على ذراع قصير ، q ذراع طويلة ، و t translocation. وهكذا ، عندما يتم حذف الذراع القصير للكروموسوم 5 ("متلازمة القط الصرخة") ، يتم وصف النمط النووي الأنثوي بـ 46 ، XX ، 5p-. إن الأم لطفل يعاني من متلازمة داون الانتقالية - وهي ناقلة ذات إزفاء متوازن من 14/21 لها نمط نووي من 45 ، XX ، t (14q؛ 21q). يتم تشكيل الكروموزوم الانتقالي عندما يتم تدمير الأذرع الطويلة للكروموسوم 14 و 21 ، بينما تضيع الأكتاف القصيرة.

وينقسم كل كتف إلى مقاطعات ، وهي بدورها تنقسم إلى أجزاء ، ويتم تحديد تلك والأجزاء الأخرى بالأرقام العربية. إن المركز المركزي للكروموسوم هو نقطة البداية لفرز المناطق والشرائح.

وبالتالي ، يتم استخدام أربعة علامات لتضاريس الكروموسومات: رقم الكروموسوم ، ورمز الكتف ، ورقم الحي ورقم المقطع داخل المنطقة المعطاة. على سبيل المثال، 6p21.3 سجل يعني أننا نتحدث عن الزوج 6TH كروموسوم، ذراعها القصير، المنطقة 21، الجزء 3. هناك شخصيات أكثر اختياري، في pter خاص - نهاية الذراع القصير، qter - نهاية الذراع الطويلة.

تسمح طريقة البحث الوراثي الخلوي بالكشف عن الحذف والتغيرات الأخرى في الكروموزومات فقط في حجم ما يقارب مليون قاعدة (نيوكليوتيدات).

[1], [2], [3], [4]