تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) في تشخيص الأمراض المعدية

يُعد تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) إحدى طرق تشخيص الحمض النووي، حيث يسمح بزيادة عدد نسخ الجزء المُكتشف من جينوم البكتيريا أو الفيروسات ملايين المرات باستخدام إنزيم بوليميراز الحمض النووي. يُضاعف (يُضخّم) الجزء المُختبر من الحمض النووي الخاص بجينوم مُعين عدة مرات، مما يسمح بتحديده. أولًا، يُقسّم جزيء الحمض النووي للبكتيريا أو الفيروسات إلى سلسلتين بالتسخين، ثم، بوجود بادئات الحمض النووي المُصنّعة (تسلسل النوكليوتيدات خاص بالجينوم المُحدّد)، ترتبط هذه البادئات بأجزاء مُكمّلة من الحمض النووي، وتُصنّع السلسلة الثانية من الحمض النووي بعد كل بادئ بوجود بوليميراز الحمض النووي الثابت حراريًا. يتم الحصول على جزيئتي حمض نووي. تُكرّر العملية عدة مرات. يكفي جزيء حمض نووي واحد، أي بكتيريا أو جسيم فيروسي واحد، للتشخيص. وقد أتاح إدخال مرحلة إضافية في التفاعل - وهي تخليق الحمض النووي على جزيء الحمض النووي الريبي (RNA) باستخدام إنزيم النسخ العكسي - اختبار فيروسات الحمض النووي الريبي، مثل فيروس التهاب الكبد الوبائي سي. تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) عمليةٌ ثلاثية المراحل تتكرر دوريًا: التحلل، وتلدين البادئ، وتخليق الحمض النووي (البلمرة). يتم تحديد كمية الحمض النووي المُخلَّقة بواسطة اختبار الإليزا (ELISA) أو الرحلان الكهربائي.

يمكن لـ PCR استخدام مواد بيولوجية مختلفة - مصل الدم أو البلازما، كشط مجرى البول، خزعة، السائل الجنبي، السائل النخاعي، إلخ. يستخدم PCR في المقام الأول لتشخيص الأمراض المعدية مثل التهاب الكبد الفيروسي B، والتهاب الكبد الفيروسي C، والتهاب الكبد الفيروسي D، وعدوى الفيروس المضخم للخلايا، والعدوى المنقولة جنسياً (السيلان، الكلاميديا، الميكوبلازما، عدوى اليوريا)، والسل، وعدوى فيروس نقص المناعة البشرية، إلخ.

إن ميزة تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) في تشخيص الأمراض المعدية مقارنة بأساليب البحث الأخرى هي كما يلي:

• يمكن اكتشاف العامل المعدي في أي بيئة بيولوجية للجسم، بما في ذلك المواد التي يتم الحصول عليها أثناء الخزعة؛
• من الممكن تشخيص الأمراض المعدية في المراحل المبكرة من المرض؛
• من الممكن تقييم نتائج البحث كميًا (كم عدد الفيروسات أو البكتيريا الموجودة في المادة التي تتم دراستها)؛
• حساسية عالية للطريقة؛ على سبيل المثال، حساسية تفاعل البوليميراز المتسلسل للكشف عن الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد ب في الدم هي 0.001 بيكو جرام/مل (حوالي 4×102 ^نسخة /مل)، في حين أن حساسية طريقة تهجين الحمض النووي باستخدام المجسات المتفرعة هي 2.1 بيكو جرام/مل (حوالي 7×105 ^نسخة /مل).

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]، [ 5 ]، [ 6 ]، [ 7 ]، [ 8 ]