تفاعل البوليميراز المتسلسل من التهاب الكبد سي

عادةً ما يكون HCV في المادة غائباً.

على عكس الطرق المصلية لتشخيص التهاب الكبد الفيروسي C ، حيث يتم اكتشاف الأجسام المضادة لـ HCV ، يمكن لـ PCR اكتشاف وجود HCV RNA مباشرة وتحديد كمية تركيزه في مادة الاختبار. الاختبار له خصوصية محددة وحساسية عالية: عشر جزيئات HCV RNA في مادة الاختبار كافية للكشف عنها. إن الكشف عن الأجسام المضادة لـ HCV يؤكد حقيقة الإصابة بالمريض فقط ، لكنه لا يسمح بالحكم على نشاط العملية المعدية (حول تكرار الفيروس) والتشخيص المرضي. وبالإضافة إلى ذلك، والأجسام المضادة لفيروس (سي) اكتشفت في دم المرضى الذين يعانون من التهاب الكبد الحاد والمزمن، وكذلك في المرضى الذين يعانون من مرض واستردادها، ولكن غالبا ما تظهر الأجسام المضادة في الدم بعد بضعة أشهر من بداية المرض السريري، مما يجعل من الصعب تشخيص. يعد اكتشاف HCV في الدم باستخدام PCR طريقة تشخيصية أكثر إفادة. يشهد اكتشاف HCV RNA في PCR على viremia ، ويسمح للحكم على تكرار الفيروس في الجسم ، ويعمل كواحد من معايير فعالية العلاج المضاد للفيروسات. إن كشف الحمض النووي الريبي HCV بواسطة PCR في المراحل المبكرة من تطور العدوى الفيروسية على خلفية الغياب الكامل لأي علامات مصلية قد يكون بمثابة أول دليل على العدوى. ومع ذلك ، فإن الكشف المعزول عن الحمض النووي الريبي HCV على خلفية غياب كامل لأي علامات مصلية أخرى لا يمكن أن يقضي نهائياً على النتيجة الإيجابية الكاذبة لـ PCR. في مثل هذه الحالات ، من الضروري إجراء تقييم شامل للدراسات السريرية والبيوكيميائية والمورفولوجية ، مع تكرار التأكيد المتكرر لوجود عدوى PCR.

من الأهمية بمكان هو استخدام طريقة PCR في المرضى الذين يعانون من التهاب الكبد الفيروسي المزمن C ، كما هو الحال في معظمهم لا توجد علاقة بين وجود تكرار الفيروس ونشاط أنزيمات الكبد. في مثل هذه الحالات ، يسمح فقط PCR بالحكم على تكاثر الفيروس ، خاصة إذا تم التعبير عن النتيجة النهائية كمياً. في معظم الحالات ، يحدث اختفاء HCV RNA من مصل الدم في وقت لاحق من تطبيع أنزيمات الكبد ، لذلك لا يمكن أن يكون تطبيعها بمثابة أساس لوقف العلاج المضاد للفيروسات.

من المهم عمليا للكشف عن HCV RNA للتحقيق عن طريق طريقة PCR ليس فقط المصل ، ولكن أيضا الخلايا الليمفاوية ، hepatobiobaptam. يمكن الكشف عن الفيروسات 2-3 مرات في كثير من الأحيان في أنسجة الكبد أكثر من المصل. عند تقييم نتائج دراسة مصل الدم لـ HCV RNA ، يجب أن نتذكر أن viremia يمكن أن تتذبذب في الطبيعة (مثل التغيير في نشاط الإنزيم). لذلك ، بعد النتائج الإيجابية لدراسة PCR ، يمكن الحصول على نتيجة سلبية والعكس صحيح. في مثل هذه الحالات ، من أجل حل الشكوك التي تنشأ ، من الأفضل التحقق من hepatobiobaths.

يستخدم الكشف عن HCV RNA في مادة تستخدم PCR للأغراض التالية:

• تحليل النتائج المشكوك فيها للدراسات المصلية.
• تمايز التهاب الكبد الفيروسي ج من الأشكال الأخرى لالتهاب الكبد.
• الكشف عن المرحلة الحادة من المرض مقارنة مع العدوى المنقولة أو الاتصال ؛ مرحلة إصابة المواليد الجدد من أمهات HCV المصلية ؛
• مراقبة فعالية العلاج المضاد للفيروسات.

المرضى الذين يعانون من التهاب الكبد الفيروسي المشتبه فيه ج:

• الجهات المانحة؛
• الأشخاص الذين يعانون من عوامل الخطر ؛
• الأشخاص مع زيادة نشاط ALT.
• المرضى الذين يعانون من التهاب الكبد الحاد

جميع الميزات المذكورة أعلاه لتقييم النتائج والنهج لتشخيص HCV باستخدام PCR ينطبق أيضا على غيرها من الالتهابات.

لا تسمح طريقة PCR فقط باكتشاف HCV RNA في المادة قيد الدراسة ، ولكن أيضًا لتحديد التركيب الوراثي. تحديد النمط الجيني للفيروس له أهمية كبيرة لاختيار المرضى الذين يعانون من التهاب الكبد الفيروسي المزمن C لإجراء العلاج مع الانترفيرون ألفا والريبافيرين. المؤشرات المخبرية لعلاج التهاب الكبد الفيروسي المزمن C مع إنترفيرون ألفا هي كما يلي:

• زيادة نشاط الترانسامينيز
• وجود HCV RNA في الدم ؛
• genotype 1 HCV؛
• viremia عالية في الدم (أكثر من 8 × 10 ⁵ نسخ / مل).

في الوقت الحاضر ، يمكن تقدير محتوى الحمض النووي الريبي HCV في مصل الدم عن طريق PCR ، وهو أمر ذو أهمية كبيرة للتحكم في علاج ألفا ألفا. يتم تقييم مستوى viremia على النحو التالي: بالنسبة لـ HCV RNA من 10 ² إلى 10 ⁴ نسخ / مل - ضعيف ؛ من 10 ⁵ إلى 10 ⁷ نسخ / مل - متوسط ، فوق 10 ⁸ نسخة / مل - مرتفع. مع العلاج الفعال ، ينخفض مستوى viremia.

[1], [2], [3], [4]